[发明专利]一种用于分离花生不同组织器官原生质体的方法及其应用

权利要求书

1.一种用于分离花生不同组织器官原生质体的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将不同花生组织器官切割成细小组织，然后进行反复冻融处理；S2、往冻融处理后的组织器官中加入酶解液，然后置于恒温振荡条件下进行酶解处理，所述酶解液包括纤维素酶、离析酶、崩溃酶、阿魏酸酯酶、皂荚皂素、山梨醇、甘露醇、MES溶液和BSA；S3、酶解后进行过滤、离心处理，收集沉淀即得原生质体；

其中，在所述酶解液中，纤维素酶的质量浓度为1-5％，离析酶的质量浓度为0.5-2％，崩溃酶的质量浓度为0.5-1％，阿魏酸酯酶的质量浓度为0.3-0.5％，皂荚皂素的质量浓度为0.05-0.1％，山梨醇的质量浓度为1-3％，甘露醇的质量浓度为4-5％，MES溶液的体积浓度为4-6％，BSA的质量浓度为0.05-0.2％。

2.根据权利要求1所述的一种用于分离花生不同组织器官原生质体的方法，其特征在于，所述花生组织器官包括但不限于花生叶片、花生茎干、花生幼嫩种子与果针。

3.根据权利要求1所述的一种用于分离花生不同组织器官原生质体的方法，其特征在于，所述MES溶液的摩尔浓度为0.1-0.3mol/L。

4.根据权利要求1所述的一种用于分离花生不同组织器官原生质体的方法，其特征在于，所述酶解液还包括终浓度为0.05-0.15mol/L的氯化钙溶液。

5.根据权利要求1所述的一种用于分离花生不同组织器官原生质体的方法，其特征在于，所述酶解液还包括终浓度为0.005-0.015mol/L的EDTA溶液。