[发明专利]一种可自动加液及调节预冻高度的精液冷冻稀释方法

权利要求书

1.一种可自动加液及调节预冻高度的精液冷冻稀释方法，其特征在于，采用自动加液稀释装置进行鲜精稀释，采用预冻装置进行预冻，其中，

所述自动加液稀释装置包括基座（1），所述基座（1）上设置有恒温水浴摇床（2），所述基座（1）上安装有伸缩支架（4），所述伸缩支架（4）的上端焊接有卡箍件（5），所述卡箍件（5）内卡接有滴定管（6），所述滴定管（6）的底端设置流量控制阀（7）；

所述预冻装置由金属网（13）、锯齿状挡边（14）、框体（20）、滑块（17）、支腿（21）、把手（16）构成，所述金属网（13）两端设置挡板（22），所述挡板（22）通过螺栓固定连接在滑块（17）上，所述金属网（13）两侧边设置锯齿状挡边（14），所述框体（20）两端固定连接滑块（17），所述滑块（17）套接在支腿（21）上，支腿（21）上等距离间隔的设有若干高度调节孔（18），滑块（17）上设有与高度调节孔（18）同等大小的开孔并通过定位螺栓（19）固定连接支腿（21）；所述把手（16）固定在所述滑块（17）上；

所述精液冷冻稀释方法包括如下步骤：

采集新鲜精液进行品质检查，精子活力大于75%，精子密度大于2.5×10⁹/ml，畸形率小于10%的可以用于冷冻保存；

将步骤1）获得的符合冷冻保存条件的新鲜精液放入50ml的烧杯（3）中，所述烧杯事先放置于自动加液稀释装置的恒温水浴摇床上预热，温度设置为36-40℃；

打开所述自动加液稀释装置的摇床，转速设定为40-120rpm；

将稀释液加入所述自动加液稀释装置的滴定管，打开滴定管下部的流量控制阀，将稀释液下滴的速度控制为50-100微升/秒；

稀释液滴尽后，关闭摇床，取下烧杯，将杯中已经稀释好的精液分装于0.25ml塑料细管中，封口；

将步骤5）获得的塑料细管和预冻装置一起置于5℃环境中平衡4小时，塑料细管与预冻装置不接触；

在5℃环境中将完成步骤6）的塑料细管快速摆放在预先调节好高度的预冻装置上，然后将预冻装置连同塑料细管一起快速转移到液氮蒸汽中熏蒸预冻10分钟，最后投入液氮中保存；所述预冻装置高度是指所述预冻装置在液氮蒸汽中熏蒸时，预冻装置的金属网距离液氮液面的高度；

使用时，取出塑料细管直接投入37℃水浴中30秒-60秒解冻；

当精液来自绵羊或山羊时，所述预冻装置的金属网（13）距离液氮液面的高度为4cm；

当精液来自番鸭时，所述预冻装置的金属网（13）距离液氮液面的高度为6cm。

2.根据权利要求1所述可自动加液及调节预冻高度的精液冷冻稀释方法，其特征在于，步骤2）中，置于恒温水浴摇床上预热的烧杯为空烧杯，或者事先加入少量稀释液，加入量最多不超过预备稀释的新鲜精液量。