[发明专利]一种鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素及其应用

权利要求书

1.一种龙利鱼鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素，其特征在于，分子量为56.2420KD，二糖组成如下：

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2.一种绿鳍马面鲀鱼鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素，其特征在于，分子量为60.5220 KD，二糖组成如下：

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3.一种比目鱼鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素，其特征在于，分子量为65.1920KD，二糖组成如下：

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4.如权利要求1-3任一项所述的鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素，其特征在于，其制备方法，包括如下步骤：

（1）将鱼皮剥离鱼体，去除鱼肉，清洗干净，剪碎后加入丙酮脱脂，得脱脂鱼皮；

（2）向步骤（1）制得的脱脂鱼皮中加入无水乙醇脱水，真空干燥，得脱脂脱水鱼皮；

（3）向步骤（2）制得的脱脂脱水鱼皮中加入三蒸水，煮沸后冷却至室温；再加入酶反应缓冲液，调节pH为5.0~9.0，加入脱脂脱水鱼皮干重1‰~5‰的蛋白酶进行酶解，固液分离取液体，制得酶解粗液；

（4）向步骤（3）制得的酶解粗液中加入终质量浓度2~8%的三氯乙酸，冰上沉淀，固液分离取液体，乙醚抽提，再按照质量体积比为1~10%加入醋酸钠粉末，单位为mg/mL；然后再加入1~5倍体积的无水乙醇，过夜沉淀，取沉淀，制得多糖粗品；

（5）将步骤（4）中制得的多糖粗品溶解于水，纯化，乙醇沉淀，固液分离取液体，超滤，干燥，制得鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素。

5.如权利要求4所述的鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素，其特征在于，满足以下条件之一项或多项：

i.步骤（1）中所述丙酮脱脂是加入3~4倍体积的丙酮脱脂3~12h，重复3~5次；

ii.步骤（2）中所述无水乙醇脱水是加入3~4倍体积的无水乙醇脱水3~12h，重复3~5次；

iii.步骤（3）中所述脱脂脱水鱼皮与三蒸水的质量体积比为1:5，单位为mg/mL；

iv.步骤（3）中所述煮沸后的沸腾时间为30~50min；所述酶解温度为40~70℃，时间为24~96h；

v.步骤（3）中所述酶反应缓冲液的组分：0.1 M硼酸，10 mM氯化钙，pH 8.0；

vi.步骤（3）中所述蛋白酶为黑曲霉蛋白酶、链霉蛋白酶E、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中的一种或多种；

vii.步骤（4）中所述冰上沉淀的时间为15~30min；

viii.步骤（4）中所述乙醚抽提是加入等体积的乙醚抽提3~4次；

ix.步骤（5）中所述纯化采用阴离子交换树脂纯化，0-2.5 M氯化钠溶液浓度梯度洗脱。

6.权利要求1-3任一项所述的鱼皮来源的硫酸软骨素/硫酸皮肤素在制备抗肿瘤药物和/或食品中的应用；所述肿瘤为乳腺癌。