[发明专利]结直肠肿瘤性病变血液tRF标志物及其应用在审
| 申请号： | 202010557526.5 | 申请日： | 2020-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN113817821A | 公开（公告）日： | 2021-12-21 |
| 发明（设计）人： | 季光;党延启;许阳贤 | 申请（专利权）人： | 上海中医药大学附属龙华医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 上海中优律师事务所 31284 | 代理人： | 潘诗孟 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 直肠 肿瘤 性病变 血液 trf 标志 及其 应用 | ||
1.血液tRF标志物在制备结直肠肿瘤性病变辅助诊断试剂盒或试剂中的应用，其特征在于，所述血液tRF标志物为tRF-Tyr-GTA-081和tRF-Ala-AGC-060的组合。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，结直肠肿瘤性病变为腺瘤或结直肠癌。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包含检测tRF-Tyr-GTA-081和tRF-Ala-AGC-060的检测试剂。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测试剂包括QPCR实验中使用的RNA反转录引物和/或DNA扩增引物，所述RNA反转录引物为Oligo(dt)引物；用于检测tRF-Tyr-GTA-081的DNA扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；用于检测tRF-Ala-AGC-060的DNA扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包含检测内参基因的检测试剂；所述内参基因为SnRNA U6，所述内参基因的检测试剂包括QPCR实验中使用的RNA反转录引物和/或DNA扩增引物，所述RNA反转录引物为Oligo(dt)引物，用于检测SnRNA U6的DNA扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
6.一种用于非诊断和治疗目的的检测结直肠肿瘤性病变组织或血液中tRF-Tyr-GTA-081和tRF-Ala-AGC-060的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)血液及组织样本收集及处理；
(2)RNA抽提；
(3)RNA的定量、前处理和逆转录：使用分光光度计测定RNA的浓度后，RNA样本进行前处理，然后配制逆转录反应液，设定程序参数；
(4)以逆转录所得的cDNA为模板，用qPCR技术检测分析tRF-Tyr-GTA-081和tRF-Ala-AGC-060在组织和血液样本中的表达水平。
7.根据权利要求6所述的用于非诊断和治疗目的检测结直肠肿瘤性病变组织或血液中tRF-Tyr-GTA-081和tRF-Ala-AGC-060的方法，其特征在于，结直肠肿瘤性病变为腺瘤或结直肠癌。
8.根据权利要求7所述的用于非诊断和治疗目的检测结直肠肿瘤性病变组织或血液中tRF-Tyr-GTA-081和tRF-Ala-AGC-060的方法，其特征在于，所述组织包括结直肠肿瘤性病变组织或结直肠癌癌旁组织。
9.根据权利要求7所述的用于非诊断和治疗目的的检测结直肠肿瘤性病变组织或血液中tRF-Tyr-GTA-081和tRF-Ala-AGC-060的方法，其特征在于，所述血液包括结直肠肿瘤性病变病人的血液以及健康志愿者血液。
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