[发明专利]结直肠肿瘤性病变血液tRF标志物及其应用

说明书

本发明属于基因工程及肿瘤医学领域，具体公开了一种用于结直肠肿瘤性病变辅助诊断的血液tRF标志物及其应用，所述血液tRF标志物为tRF‑Tyr‑GTA‑081和tRF‑Ala‑AGC‑060的组合；该血液tRF标志物可用于结直肠肿瘤性病变的辅助诊断。本发明还公开了一种用于结直肠肿瘤性病变辅助诊断的试剂盒，该试剂盒用于检测血液中的tRF‑Tyr‑GTA‑081和tRF‑Ala‑AGC‑060，包含检测tRF‑Tyr‑GTA‑081和tRF‑Ala‑AGC‑060的检测试剂，所述检测试剂包括QPCR实验中使用的RNA反转录引物和/或DNA扩增引物。该血液tRF标志物组合可用于结直肠肿瘤性病变的筛查和诊断，检出成功率高，技术重现性好，有助于反映结直肠肿瘤性病变无症状高危人群的疾病状态，为临床医生快速准确掌握患者病情、及时采取更具个性化的防治方案提供支持。

技术领域

本发明属于基因工程及肿瘤学领域，涉及一种新的结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)血液tRF标志物及其应用。

背景技术

根据最新的全球癌症统计数据，结直肠癌(CRC)是全球第三大常见癌症，也是第二常见的致死癌症。2015年中国结直肠癌的新增病例和死亡人数分别为39万和19万。此外，未来数年，这一数字将继续呈上升趋势。最近的一项研究表明，约85％的CRCs可能由腺瘤转化而来。此外，在不同类型的腺瘤中，进展期腺瘤已被证明是CRC更明显的危险因素。因此，在临床应用中，早期筛查和诊断结直肠肿瘤性病变，包括腺瘤和CRC，对后续的治疗至关重要。

结肠镜检查被认为是结直肠肿瘤性病变筛查的金标准。然而，结肠镜检查存在漏检率以及覆盖不全等缺点。此外，在中国城市，大肠癌高危人群的结肠镜检查符合率仅约为15％。所有这些负担都干扰了结直肠肿瘤性病变的早期筛查及诊断。尽管已发现一些肿瘤标志物，如癌胚抗原(CEA)和糖类抗原(如CA19-9、CA74-2等)等，但对结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)诊断的敏感度和特异度均有限，尤其在发现早期结直肠肿瘤性病变和鉴别侵袭性无痛性肿瘤方面。因此，寻找新的特异性高和敏感性好的标志物越来越受到国内外的重视。因此，迫切需要建立一种新的结直肠肿瘤病变筛选技术，该技术应简单易行，以提高符合率。

转移RNA(Transfer RNA,tRNA)是一种重要的调节性非编码RNA，参与疾病的各个过程。tRNAs被特异性酶裂解后可产生多种tRNA来源的片段(tRFs)。越来越多的证据表明，tRFs参与各种疾病的发生和发展，包括癌症。因此，tRFs可以作为结直肠肿瘤性病变的生物标志物。

目前还没有用于结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)诊断的较为稳定的生物标志物的报道，若能筛选出结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)异常表达的全血(包含血清或血浆)tRFs作为生物标志物，并开发出相应的诊断试剂盒，将会有力的推动我国结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)的筛查及诊断。

发明内容

针对现有技术存在的问题和不足，发明人希望通过分离和研究结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)患者以及与肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)患者年龄、性别匹配的健康人对照全血(包含血清或血浆)中tRFs，寻找一组与结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)高度相关的高特异性和敏感性的tRFs，并研制出可便于临床应用的结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)诊断试剂盒，为结直肠肿瘤性病变(包括腺瘤和结直肠癌)的筛查和诊断提供数据支持，为发现具有潜在治疗价值的新型小分子药物提供数据支持。

为实现发明目的，本发明采用的技术方案如下：