[发明专利]自然水体中抗癌药物的检测分析方法

说明书

本发明公开了一种自然水体中抗癌药物的检测分析方法，通过自动固相萃取仪和固相萃取小柱结合的前处理，与高效液相色谱—质谱仪连用，同时检测自然水体中抗癌药物，包括多柔比星、伊马替尼、依托泊苷、环磷酰胺、他莫昔芬及其降解产物N‑去甲基‑4‑羟基三苯氧胺。本发明方法步骤如下：先将采集的自然水体样品经过过滤，加入盐酸调节pH至2‑3，加入乙二胺四乙酸二钠和内标；再使用自动固相萃取仪和固相萃取小柱联用来提取、净化样品抗癌药物；然后通过高效液相色谱—质谱仪检测水样中目标物的含量。本发明方法对水样中抗癌药物的处理步骤简单，操作方便，稳定性好，能够快速得到适于液质联用仪检测的样品；样品预处理成本低。

技术领域

本发明属于药物痕量检测领域，涉及一种自然水体中抗癌药物的检测方法，利用自动固相萃取仪和固相萃取小柱联用，结合高效液相色谱—质谱的技术。

背景技术

抗癌药物主要应用在癌症治疗当中，其来源广泛，包括医院产生的废水，患者产生的家庭废水，药物制造商产生的废水以及有些药物被当成固废处理产生的废液等。随着全球癌症患者的增加，抗癌药物作为一种重要的治疗手段，其用量也随之增加。不幸的是，在治疗过程中，无论是好的细胞还是坏的细胞都会受到抗癌药物的影响。抗癌药物具有细胞毒性，遗传毒性‘三致’作用，并且能够干扰DNA的结构和功能，扰乱和抑制细胞的生长，最终导致细胞死亡。抗癌药物被解剖治疗分类(ATC)分为五大类，包括烷化剂类，抗代谢产物类，植物生物碱和其他天然产物类，细胞毒性抗生素类和其他相关物资类。其中环磷酰胺，他莫昔芬等多种抗癌药物已经被国际癌症研究机构(IARC)列为人类致癌物质。

抗癌药物首次是在上世纪70年代被发现存在于自然水体中，其在自然水体中的含量并不是很大，大多数是在微克/升到纳克/升的浓度范围内。低含量的存在对准确快速的检测干扰较大，对样品的净化富集水平要求较高。目前针对自然水体中样品的预处理方法主要是液液萃取、加速溶剂萃取法，手动固相萃取，存在耗费较多的提取溶剂，实验所需时间较长，步骤复杂等问题。本发明采用的固相小柱萃取技术可以有效分离待测组分与样品基质，克服基质效应，实验结果重现性好，回收率高，检测结果准确。

尽管抗癌药物的含量浓度较低，但是其危害性大。因此合理地制定这类物质的各种使用标准，需要一种快速、灵敏的检测出目标物的方法，开发一种预处理方法、检测方法是必要的、可行的。

发明内容

为了解决现有技术问题，本发明的目的在于克服已有技术存在的不足，提供一种自然水体中抗癌药物的检测分析方法，能对自然水体中抗癌药物进行预处理，以改善现有处理方法的过程复杂，且成本较高的技术问题。同时，进行自然水体中抗癌药物的高效液相色谱—质谱的检测，该检测方法能够同时检测6种抗癌药物，包括多柔比星(Doxorubicin、DOX)、伊马替尼(Imatinib、IMA)、依托泊苷(Etoposide、ETP)、环磷酰胺(Cyclophosphamide、CP)、他莫昔芬(Tamoxifen、TAM)及其降解产物N-去甲基-4-羟基三苯氧胺(N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen、OH-D-TAM)。检测过程快速、高效、低成本、高度自动化且便于产业化应用。

为达到上述发明创造目的，本发明采用如下技术方案：

一种自然水体中抗癌药物的检测分析方法，步骤如下：

a.样品的预处理：

将采集的自然水体样品经过110毫米的滤膜过滤再经过47毫米的玻璃纤维过滤膜过滤，加入盐酸调节pH至2-3，然后加乙二胺四乙酸二钠以及内标Cyclophosphamide-d4；

b.使用自动固相萃取仪和固相萃取柱进行富集净化：