[发明专利]一种婴儿双歧杆菌冻干粉、制备方法及其所用复合保护剂在审
申请号: | 202010561524.3 | 申请日: | 2020-06-18 |
公开(公告)号: | CN111647510A | 公开(公告)日: | 2020-09-11 |
发明(设计)人: | 马玉涛;韩登兰;崔宁;李国强;耿宏伟;崔兆臣 | 申请(专利权)人: | 科兴生物制药股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04;C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人: | 李萍 |
地址: | 250200 山东省济*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 婴儿 杆菌 干粉 制备 方法 及其 所用 复合 保护 | ||
1.一种双歧杆菌的冻干粉复合保护剂,其特征在于,按照复合保护剂的重量百分比计,复合保护剂包括10~30%脱脂奶粉、0.1~5.0%氨基酸及其盐、3~25%二糖或/和多糖、1~5%小分子多元醇、余量的磷酸盐缓冲液,且复合保护剂的pH为6.5~8.5。
2.根据权利要求1所述双歧杆菌的冻干粉复合保护剂,其特征在于,氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、甲硫氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、组氨酸、精氨酸中的任一种或多种组合。
3.根据权利要求1或2所述双歧杆菌的冻干粉复合保护剂,其特征在于,二糖选自海藻糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖中的任一种或多种组合;优选地,多糖选自淀粉、纤维素、菊糖、果胶、花粉多糖、玉米须多糖、枣多糖、无花果多糖、茶多糖、芦荟多糖、桑叶多糖、龙眼多糖、茶多糖、芦荟多糖、桑叶多糖、龙眼多糖中的任一种或多种的组合。
4.根据权利要求1~3任一项所述双歧杆菌的冻干粉复合保护剂,其特征在于,复合保护剂的制备方法包括:
(1)将脱脂奶粉与小分子多元醇溶于磷酸缓冲液中,高温灭菌,得A液;
(2)将二糖或/和多糖溶于磷酸缓冲液中,高温灭菌,得B液;
(3)将氨基酸及其盐溶于磷酸缓冲液中,用滤膜过滤除菌,得C液;
(4)将A液、B液、C液在无菌条件下混合,即得。
5.一种婴儿双歧杆菌冻干粉,其特征在于,所用复合保护剂为权利要求1~4任一项所述双歧杆菌的冻干粉复合保护剂。
6.一种根据权利要求5所述婴儿双歧杆菌冻干粉的制备方法,其特征在于,将湿菌泥与复合保护剂混合,30~45℃平衡20min~60min,于-20~-60℃下预冻3~10h,再进行冷冻干燥,即得。
7.根据权利要求6所述婴儿双歧杆菌冻干粉的制备方法,其特征在于,湿菌泥与复合保护剂的重量比为(0.2~3.5):1。
8.根据权利要求6或7所述婴儿双歧杆菌冻干粉的制备方法,其特征在于,湿菌泥的制备过程包括菌种活化、一级菌种培养、二级菌种培养、发酵培养、收集菌体的步骤。
9.根据权利要求8所述婴儿双歧杆菌冻干粉的制备方法,其特征在于,发酵培养所用发酵培养基中含有助剂,助剂包括第二组分氨基酸、第二组分多元醇以及蒸馏水,且第二组分多元醇的相对分子量为100~400g/mol。
10.根据权利要求8所述婴儿双歧杆菌冻干粉的制备方法,其特征在于,按照助剂的重量百分比计,助剂包括0.01~0.5%第二组分多元醇、0.01~0.3%第二组分氨基酸以及余量蒸馏水。
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