[发明专利]一种苦荞提取物的鉴别方法

权利要求书

1.一种苦荞提取物的检测方法，其特征在于，由下述步骤组成：

（1）参考色谱条件和系统适用性

a）色谱柱：十八烷基键合硅胶柱；

b）流动相：乙腈-0.1%磷酸按照如下条件进行梯度洗脱：

时间/min	乙腈	0.1%磷酸
0	10	90
20	25	75
40	40	60

c）流速：1.0 mL/min；

d）柱温：30℃；

e）检测波长：360 nm；

f）理论塔板数按芦丁峰计算应不低于2000；

（2）溶液制备

对照品溶液制备

精密称量槲皮素-3-芸香糖苷-7-葡萄糖苷10mg于100mL的容量瓶中，加入20%甲醇溶液80mL，超声溶解十分钟后，放置至室温，用20%甲醇溶解定容至刻度，摇匀即得槲皮素-3-芸香糖苷-7-葡萄糖苷母液；

精密称量芦丁对照品10mg于10mL的容量瓶中，加入甲醇溶液8mL，超声溶解十分钟后，放置至室温，用甲醇溶解定容至刻度，摇匀即得芦丁母液；

精密称量山奈酚-3-O-芸香糖苷对照品10mg于50mL的容量瓶中，加入甲醇溶液40mL，超声溶解十分钟后，放置至室温，用甲醇溶解定容至刻度，摇匀即得山奈酚-3-O-芸香糖苷母液；

精密称量异鼠李素-3-O-芸香糖苷对照品10mg于50mL的容量瓶中，加入甲醇溶液40mL，超声溶解十分钟后，放置至室温，用甲醇溶解定容至刻度，摇匀即得异鼠李素-3-O-芸香糖苷母液；

精密称量槲皮素对照品10mg于25mL的容量瓶中，加入甲醇溶液20mL，超声溶解十分钟后，放置至室温，用甲醇溶解定容至刻度，摇匀即得槲皮素母液；

精密称量山奈素对照品10mg于100mL的容量瓶中，加入甲醇溶液80mL，超声溶解十分钟后，放置至室温，用甲醇溶解定容至刻度，摇匀即得山奈素母液；

分别精密量取槲皮素-3-芸香糖苷-7-葡萄糖苷、芦丁、山奈酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山奈素1mL、5mL、1mL、1mL、1mL、1mL于10mL容量瓶中，甲醇定容，得混合对照品溶液；

待测试品溶液制备

精密称量待测试品30mg于50mL容量瓶中，加入60%乙醇40mL，超声溶解十分钟后，放置至室温，用60%乙醇溶解定容至刻度，摇匀后，用0.45 μm针式过滤器过滤后，即得待测试品溶液；

（3）测定

分别吸取对照品溶液和待测试品溶液10μL进行测定；

苦荞提取物待测试品溶液中具有槲皮素-3-芸香糖苷-7-葡萄糖苷、芦丁、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山奈素保留时间基本一致的色谱峰，不具有异鼠李素-3-O-芸香糖苷色谱峰；对照品溶液对应组分保留时间具体为：槲皮素-3-芸香糖苷-7-葡萄糖苷的保留时间为10.27min、芦丁的保留时间为18.38min、山奈酚-3-O-芸香糖苷的保留时间为21.09min、异鼠李素-3-O-芸香糖苷的保留时间为21.63min，槲皮素的保留时间为31.73min、山奈素的保留时间为38.81min。