[发明专利]一种用于排阻色谱法提取外泌体的出峰位置分子标记方法有效
申请号: | 202010569242.8 | 申请日: | 2020-06-20 |
公开(公告)号: | CN111659158B | 公开(公告)日: | 2022-02-08 |
发明(设计)人: | 吴利先;王国富;杨国平;耿玲;王聪;陈晓文;陈越;高婧华 | 申请(专利权)人: | 大理大学 |
主分类号: | B01D15/12 | 分类号: | B01D15/12;B01D15/14;C12N5/071;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/86;G01N30/88 |
代理公司: | 昆明金科智诚知识产权代理事务所(普通合伙) 53216 | 代理人: | 胡亚兰 |
地址: | 671003 云南省*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 色谱 提取 外泌体 位置 分子 标记 方法 | ||
1.一种用于排阻色谱法提取外泌体的出峰位置分子标记方法,其特征在于,包括:
步骤1,配制蓝色葡聚糖溶液;
步骤2,准备待分离的外泌体样品;
步骤3,将配制好的蓝色葡聚糖溶液与待分离的外泌体样品进行均匀混合;
步骤4,将混合后样品进行柱洗脱,从洗脱开始出现蓝色时进行外泌体收集直至蓝色消失为止,即可实现对外泌体的收集;
步骤1中所述蓝色葡聚糖为水溶性蓝色葡聚糖;
所述蓝色葡聚糖溶液是通过用0.1 mM PBS将水溶性蓝色葡聚糖配制成浓度为1 mg/mL的溶液;
所述蓝色葡聚糖溶液与待分离的外泌体样品是按照体积比为1:1进行混合的。
2.如权利要求1所述的一种用于排阻色谱法提取外泌体的出峰位置分子标记方法,其特征在于,当所述待分离的外泌体样品为血清样本时,将所述血清样本与所述蓝色葡聚糖溶液直接按1:1的体积比混合。
3.如权利要求1所述的一种用于排阻色谱法提取外泌体的出峰位置分子标记方法,其特征在于,所述待分离的外泌体样品为细胞培养上清时,取所述蓝色葡聚糖溶液60倍体积量的细胞培养上清用浓缩离心管浓缩到与所述蓝色葡聚糖溶液体积量相同后再与所述蓝色葡聚糖溶液按1:1的体积比混合。
4.如权利要求1所述的一种用于排阻色谱法提取外泌体的出峰位置分子标记方法,其特征在于,所述柱洗脱是通过Sephacryl S-300(丙烯葡聚糖凝胶S-300)或Sephacryl S-200(丙烯葡聚糖凝胶S-200)进行的。
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