[发明专利]一种犬细小病毒的检测引物、试剂盒及其使用方法在审
| 申请号： | 202010572155.8 | 申请日： | 2020-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN111500793A | 公开（公告）日： | 2020-08-07 |
| 发明（设计）人： | 李一鸣;李清扬;焦义然;张婵;石磊;范葶莉;时国强;李翀;王琨 | 申请（专利权）人： | 河北三狮生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 李坤 |
| 地址： | 050000 河北省石家庄市高新*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细小 病毒 检测 引物 试剂盒 及其 使用方法 | ||
1.一种犬细小病毒的检测引物，其特征在于，所述检测引物的序列为：
上游引物CPVF：5′-TAGACCGTTACTGACATTCGC-3′；
下游引物CPVF：5′-AATTCGAGTCTCTTTAACGTCTTCT-3′。
2.一种检测犬细小病毒的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的检测引物。
3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括Tap酶、10×Taq酶反应缓冲液、dNTP和去离子水。
4.权利要求3所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，具体操作为：提取待测病毒的基因组DNA为模板，用所述试剂盒进行PCR扩增，将PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。
5.如权利要求4所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述PCR扩增的体系包括以下试剂及用量：Tap酶0.5μL，10×Taq酶反应缓冲液2.5μL，dNTP0.5μL，20μmol/L的上游引物0.5μL，20μmol/L的下游引物0.5μL和模板2.0μL和三蒸水18.5μL。
6.如权利要求4所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应条件为：94℃预变性2min；94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸40s，共进行35个循环；72℃延伸3min。
7.如权利要求4所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：所述待测病毒的基因组DNA的提取采用酚氯仿法或基因组提取试剂盒提取。
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