[发明专利]利用改进的En值判定检测结果准确度的方法

说明书

本发明涉及一种改进的En值判定检测结果准确度的方法，该方法主要应用于最大可能数（MPN）法测定微生物指标结果准确性的评价。由于传统En值评价方法只能适用于不确定度属于对称分布的情况，对于MPN值的不确定度为非对称分布的情况，传统En值评价方法却无法适用。因此本发明对En值进行了改进，使得所提供的评价方法也能适用于不确定度为非对称分布的情况。改进的En值可以适用于被测物品的参考值的不确定度和测量结果的不确定度任何一个或两者均为非对称分布的情况。具体适用于评价MPN法测定微生物指标的能力验证/能力考核结果，还可以用于日常质控样品的准确度评价。

技术领域

本发明涉及一种利用改进的En值判定检测结果准确度的方法，主要应用于最大可能数(MPN)法测定微生物指标结果准确性的评价。

背景技术

最大可能数(MPN)法很早就应用于总大肠菌群和粪大肠菌群等微生物分析项目，该方法是多管发酵法和酶底物法(HJ 1001-2018水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定酶底物法[S].HJ1001-2018Water quality—Determination of totalcoliforms,fecal coliforms and Escherichia coli—Enzyme substrate method[S])的理论基础，获得了广泛应用。该方法不同于平板计数法用菌落数量直观表示测量结果，而是通过概率理论而获得最大可能数值，同时给出该测量结果的置信区间，可以是95％概率(包含因子k＝2)和99％概率(包含因子k＝3)，该置信区间可以作为MPN值的扩展不确定度使用[胡巅,李素芳,丁武.MPN法检测结果的不确定度及其评定[J].现代预防医学.2013,40(10)：1939-1942.HU Dian,LI Su-fang,DING Wu.The uncertainty and its evaluationon the testing result by the MPN determination[J].Modern PreventiveMedicine.2013,40(10)：1939-1942]。该不确定度的分布与常见的正态、三角型、梯形、矩形等对称分布不同，它属于不对称分布，其形状类似于色谱分析中的拖尾峰，表现为MPN值与置信下限的差值小，而与置信上限的差值大。这也符合微生物测定结果大多属于偏态分布的特征。在对微生物项目测量结果评价时，目前常见的处理方式是将测量结果转换成对数，使其近似对称分布或近似正态分布后，再进行精密度或准确度评价。但是，这种处理方式能否客观反映原来数据的特性，尚有一定的不确定性。

粪大肠菌群直接来源于粪便，被广泛应用为衡量水体粪便污染的指示微生物，水体存在粪大肠菌群表明水体已被粪便污染，该项目是地表水环境质量标准、污水综合排放标准等各类标准的监测指标。多管发酵法是传统的粪大肠菌群检测方法，因具有不受浊度影响,可以检验浊度较大水样,价格便宜等优点，被广泛使用。本申请人的单位组织8家实验室开展了粪大肠菌群(MPN法)的能力考核，尝试用各种统计方法如稳健统计方法、改进的经典统计法和En值法等进行评价。然而，稳健统计方法主要适用于15家以上实验室参加的能力验证/能力考核的结果评价；改进的经典统计法虽然适用于10家左右的实验室参加的能力验证/考核结果评价，但一般适用于有精密度限值的化学分析项目；En值法适用于1家实验室参加的测量审核，该方法与上述2种方法区别在于考虑了参加实验室的不确定度，需实验室提供测量结果的不确定度，与指定值的不确定度共同使用，且这2个不确定度属于对称分布时才能使用，而目前微生物的定量标准菌株的量值为多家实验室共同协作测定获得，给出的不确定度大多为对称分布，而MPN值的不确定度为非对称分布，因此，前述3种评价方法均不能应用于MPN法准确度评价。

于慧霞等人发表了《生活饮用水中总大肠菌群不确定度的评定》，该文章中指出，采用GB5750-2006《生活饮用水标准检验方法》中51孔定量盘法测总大肠杆菌群。相比发酵法，该方法操作简便，24小时可报结果。