[发明专利]一种管栖生物精细运动的可视化培养方法有效
申请号: | 202010574850.8 | 申请日: | 2020-06-22 |
公开(公告)号: | CN111869602B | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 孙瑜;吴岸译;伍佩怡;吴照坤;吴嘉宁;吴志 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | A01K61/00 | 分类号: | A01K61/00;A01K63/00 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 张金福 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 精细 运动 可视化 培养 方法 | ||
本发明提出一种管栖生物精细运动的可视化培养方法,包括以下步骤:选择管栖生物样本以及选择用于培养样本的玻璃管;将样本的生物管的底部剪开形成开口,从生物管顶部至底部方向缓慢挤压管体,使样本中的生物体与生物管脱离,清洗生物体表面;将生物体转移至玻璃管;将生物体尾部伸出玻璃管的一端设置,对生物体尾部进行培养,生物体尾部分泌粘液后固化成封闭管口;将生物体放置在无环境压力的生态缸中培养3天以上,得到中段为透明玻璃管,首尾两端为膜质生物管的三段式结构的管栖生物精细运动观察样本,可应用于管栖生物精细运动观察。
技术领域
本发明涉及生物观察技术领域,更具体地,涉及一种管栖生物精细运动的可视化培养方法。
背景技术
水生管栖动物靠快速缩入掩埋在砂石中的空心管中来确保生存,这种可完全容纳生物体的空心管来源于生物体自身分泌物的固化,包括鞘质软管或钙质硬管。在解除威胁后,管栖动物通常会缓慢地把身体的一部分伸出管外,用于呼吸或者进食。目前对采集的管栖动物的处理方法主要通过刺激生物体至无生物反应后,存储在70%的酒精新液中保存[1](李福新.胶州湾几种管栖动物的采集方法[J].动物学杂志,1963(02):46-49.)。
研究者们试图了解生物体在管内的精细化运动,然而,上述管栖动物的处理方法仅适用于标本保存,无法实现管栖生物的生物反应及其精细运动的观察,而管栖生物生存的不透明管极大的限制了观察条件。
发明内容
本发明为克服上述现有技术所述的管栖生物生存的不透明管影响对管栖生物精细运动的观察的缺陷,提供一种管栖生物精细运动的可视化培养方法。
为解决上述技术问题,本发明的技术方案如下:
一种管栖生物精细运动的可视化培养方法,包括以下步骤:
S1:前期准备:选择管栖生物样本以及选择用于培养样本的玻璃管;
S2:压迫离管:将样本的生物管的底部剪开形成开口,从生物管顶部至底部方向缓慢挤压管体,使生物体与生物管脱离,清洗生物体表面;
S3:诱导换管:将生物体转移至玻璃管;
S4:管底培养:将生物体尾部伸出玻璃管的一端设置,对生物体尾部进行培养,生物体尾部分泌粘液结合沙石后固化成封闭管口;
S5:静置培养:将生物体放置在无环境压力的生态缸中培养3天以上,得到中段为透明玻璃管,首尾两端为膜质生物管的三段式结构的管栖生物精细运动观察样本。
本技术方案中,完成换管及培养后的生物体呈三段式结构,其下端尾部伸出玻璃管的一端设置,且尾部分泌粘液结合沙石后固化成封闭且不透明的膜质生物管,其上端分泌出一小段不透明的膜质生物管,其中段为人工选择的玻璃管,生物体分泌的粘液贴合玻璃管的管壁后固化,与玻璃管形成一体,呈光滑透明状,可用于清晰观察样本管栖生物的精细运动。
优选地,S1步骤中,选择用于培养管栖生物样本的玻璃管的直径等于或小于管栖生物样本的生物管的直径。
优选地,S1步骤中,用于培养管栖生物样本的玻璃管选择使用薄壁玻璃管。
优选地,S3步骤中,采用两相界面诱导法进行诱导入管。
优选地,S3步骤中,其具体步骤如下:
S31:将玻璃管垂直置入由纯净人工海水制成的水相中,管口位置高于水平面且处于气相中;
S32:将生物体的尾部伸入玻璃管,调整管口高度,使生物体的尾部接触水相、气相转换界面,同时确保生物体的身体只处于气相中,保持上述状态一定时间,生物体沿着玻璃管向水相移动至生物体完全进入下方水相中;
S33:将玻璃管旋转90°并保持数秒,排除生物体尾部带入的空气。
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