[发明专利]核酸检测的方法及其装置和在COVID-19检测中的应用

权利要求书

1.一种核酸检测的装置，包括检测板、底板和盖板，其特征在于所述底板置于所述检测板之下，

所述的检测板包括：

第一腔，其用于RT-RAA扩增；

第二腔，其内盛纳缓冲液；

第三腔，其内放置试纸条；

第一连接槽，其与所述的第一腔连通；

第二连接槽，其与所述的第二腔连通；

第三连接槽，其分别与所述的第一连接槽、所述的第二连接槽和所述的第三腔连通，其为所述的第一腔、所述的第二腔、所述的第三腔、所述的第一连接槽和所述的第二连接槽提供支撑；

所述的第三连接槽设置于所述检测板的底端，所述的第一连接槽和所述的第二连接槽设置于所述的第三连接槽的上方侧，所述的第一连接槽和所述的第二连接槽相交接，而使所述的第一连接槽和所述的第二连接槽连通，所述的交接处位于所述的第三连接槽的上方侧；

所述盖板，覆于所述的检测板之上，包括第一孔、第二孔和第三孔，所述的第一孔和所述的第二孔分别用于向所述的第一腔和所述的第二腔对应的加入用于RT-RAA扩增的组合物，以及试纸条缓冲液，所述的第三孔用于排气。

2.根据权利要求1所述的装置，其特征在于在所述试纸条的结合垫上固定胶体金结合抗FAM抗体，T线处固定标记有链霉亲和素的抗体，在C线处固定荧光素抗体。

3.根据权利要求1所述的装置，其特征在于所述的检测板系采用微流控技术。

4.根据权利要求1所述的装置在制造COVID-19核酸检测试剂盒中的应用。

5.一种非诊断目的的核酸检测方法，并采用如权利要求1所述的核酸检测装置，其特征在于包括如下扩增步骤：

向检测板第二腔内加入试纸条缓冲液，以及

向检测板第一腔内加入分子拥挤试剂、样本核酸、引物对和反应干粉酶试剂的混合物；

接着，向第一腔内加入核酸扩增启动剂；

然后，颠倒检测板，使位于底端的第三连接槽处于上方侧，并振荡第一腔内物质后，立于37℃～42℃恒温设备内，3～7分钟后取出，再次振荡第一腔内物质，再次立于37℃～42℃恒温设备内继续扩增，9～13分钟后取出，反应结束。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的引物对如下：

5’端标记荧光基团的上游引物：gcaacagttcaagaaattcaactccaggcagc和

5’端标记Biotin的下游引物：tagtgacagtttggccttgttgttgttggcct。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的荧光基团为FAM。

8.一种试剂盒，其特征在于包括权利要求1所述的装置。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于还包括如下引物对：

5’端标记荧光基团的上游引物：gcaacagttcaagaaattcaactccaggcagc和

5’端标记Biotin的下游引物：tagtgacagtttggccttgttgttgttggcct。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于所述的荧光基团为FAM。

11.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于还包括分子拥挤试剂、核酸扩增启动剂和反应干粉酶试剂。

12.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于还包括说明书，其上记载如下扩增步骤：

将分子拥挤试剂、核酸扩增启动剂、反应干粉酶制剂和扩增引物对共混后，置入37～42℃恒温设备内，3分钟～7分钟后取出，再次振荡第一腔内物质，再次立于37℃～42℃恒温设备内继续扩增，9～13分钟后取出，反应结束。