[发明专利]核酸检测的方法及其装置和在COVID-19检测中的应用

说明书

一种核酸检测的装置，包括第一腔、第二腔、第三腔、第一连接槽、第二连接槽和第三连接槽。第一腔用于RT‑RAA扩增，第二腔内盛纳缓冲液，第三腔内放置试纸条。第一连接槽与第一腔连通，第二连接槽，其与第二腔连通，第三连接槽分别与第一连接槽、第二连接槽和第三腔连通。基材为第一腔、第二腔、第三腔、第一连接槽、第二连接槽和第三连接槽提供支撑。本发明提供的装置，可在物理封闭的环境中，通过核酸检测试纸条快速检测核酸扩增产物。其具有操作简单、判读迅速、防止污染、不含有毒物质、无需大型仪器设备等特点，能完全满足COVID‑19疫情现场检测的要求，有助于疫情早诊断、早隔离、降低感染率以及控制疫情蔓延。

技术领域

本发明涉及一种检测物质的方法，尤其涉及一种核酸检测方法及其装置，以及在COVID-19病毒检测中的应用。

背景技术

结合侧流层析试纸条的逆转录重组酶介导等温核酸扩增技术是将逆转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA技术)与侧流层析试纸条(Lateral flow dipstick，LFD)技术相结合，应用试纸条直接检测RAA扩增产物的一项技术。RAA-LFD技术以RAA技术为基础，主要利用一条5’末端标记荧光基团(通常为FAM)的特异性探针(nfo探针)和一条5’末端标记有生物素或者地高辛的反向引物，在恒温37℃～42℃下进行20分钟～40分钟后即可形成具有双标记的扩增产物。当用试纸条进行检测时，待检扩增产物利用毛细管作用向预先包被有FAM抗体-纳米金颗粒的结合区流动。FAM抗体-纳米金颗粒与双标记的扩增产物中的FAM结合后形成免疫复合物。检测线(test，T)处包被有生物素抗体，当免疫复合物扩散到检测线时，双标记的扩增产物中的生物素被生物素抗体捕获并形成肉眼可见的免疫复合物。质控线(control，C)包被有二抗抗体，可与FAM抗体-纳米金颗粒结合并发生显色反应。该方法以其反应快速、操作简便、无需特殊设备等特点，特别适用于低资源地区或者POCT检验模式。然而这些方法仍然存在操作复杂、灵敏度低等、集成化程度低等问题。因此，目前迫切需要发展更为简单、廉价、集成化程度高的新型即时检测技术，用于生物医学分析。

微流体平台可以实现分析处理的集成，包括试剂转移、分离、混合、反应和检测都在一个小器件内(如：芯片)。现已开发了多种基于微流控芯片的即时检测策略。例如：将ELISA过程集成到微流控气动芯片上(IV-Chip)，实现了心梗三项肌钙蛋白(cTnI)、肌红蛋白(Myo)以及肌酸激酶同酶(CK-MB)的可视化定量检测(Lab Chip 2016，16，2955-2962)。为了便于酶联免疫吸附法在检测中的应用，出现了一种高集成的基于距离读数的“样本输入-应答”的ELISA芯片，其将繁琐的酶联免疫吸附法集成到微流控装置中，仅通过简单的永磁体操作即可检测疾病生物标志物。(Biosens.Bioelectron.2017，96，332)

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种核酸检测的方法，以缩短核酸检测的时间，提高检测的便利性。

本发明的另一个目的在于提供一种核酸检测的装置，利于对生物体实施核酸检测，提高检测的便利性。

本发明的再一个目的在于提供一种核酸检测的装置，以其作为微流控芯片，提高核酸扩增和检测的集成化水平，加快检测速度。

本发明的又一个目的在于提供一种检测COVID-19核酸的试剂盒，利于将上述核酸检测方法应用于COVID-19的核酸检测，以免发生交叉污染。

一种核酸检测的装置，其包括：

第一腔，其用于RT-RAA扩增；

第二腔，其内盛纳缓冲液；

第三腔，其内放置试纸条。

为了便于试样按需进行混合，本发明的装置还设置若干连接槽，分别与各个腔连通。

另一种核酸检测的装置，其包括：

第一腔，其用于RT-RAA扩增；