[发明专利]一种光敏检测系统及其制作方法和应用

权利要求书

1.一种光敏检测系统，其特征在于，包括：

(1)包被有特定光敏剂的光敏微球；

(2)配体受氧能量转换微球(以下简称配体微球)；

所述光敏剂的制作方法为：以重量份数计，将50-100份的四氨基酞菁铜、2.12-3.15份四氟邻苯二甲腈、0.02-0.10份氯化铜(Ⅱ)、30-90份羟基乙酸乙酯、50-120份碳酸钾和800-1200份吡啶加入到15000份甲苯中，在氮气的保护下加热回流反应4-8小时；真空蒸除溶剂后，用氯仿溶解过滤，滤液减压蒸干后，在正己烷中重结晶得到所述光敏剂。

2.一种根据权利要求1所述的光敏检测系统的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、制作光敏剂，所述光敏剂的制作方法为：以重量份数计，将50-100份的四氨基酞菁铜、2.12-3.15份四氟邻苯二甲腈、0.02-0.10份氯化铜(Ⅱ)、30-90份羟基乙酸乙酯、50-120份碳酸钾和800-1200份吡啶加入到15000份甲苯中，在氮气的保护下加热回流反应4-8小时；真空蒸除溶剂后，用氯仿溶解过滤，滤液减压蒸干后，在正己烷中重结晶得到所述光敏剂；

S2、制作光敏微球

取用羧基化微球，经水和乙醇洗涤后，在30000rpm下离心15-20分钟，加入氨基乙醇，采用油浴法在105℃和搅拌的条件下加热，加热10分钟后加入S1所述光敏剂，加入光敏剂后5分钟加入氢氧化钠；然后在两小时内缓慢降低至室温；冷却后，混合物用乙醇稀释，然后在30000rpm下离心30min，弃去上清，在乙醇中超声重悬沉淀；重复离心，沉淀以水重悬，然后再以乙醇水溶液重悬，得到光敏微球；

S3、制作配体微球

包括：制备配体微球能量剂；使用配体微球能量剂标记待检测物的亲和素；使用标记待检测物亲和素的配体微球能量剂制备配体微球。

3.根据权利要求2所述的一种光敏检测系统的制作方法，其特征在于，S3中所述制备配体微球能量剂的方法为：

①制作配体微球能量剂前体a

在500ml无水甲醇中加入10-23.0克醋酸铵，16.3克N-[(2’-吡啶基)-2一氧代乙基]吡啶碘化合物，和10.76克1-(3-吡啶基)-3-(二甲氨基)-2-丙烯-1-酮溶液在搅拌下回流24小时；反应液冷至室温后，在-15℃放置1小时，过滤收集沉淀，用冷甲醇在-10℃--20℃温度下充分洗涤后，产品用乙腈重结晶，得配体微球能量剂前体a；

②制作配体微球能量剂前体b

将4.5克配体微球能量剂前体a加入到45ml硫酸45ml醋酸12ml水混合的溶液中；在75-80℃下搅拌反应48小时后，反应液加入到300ml冰水中，过滤收集沉淀，用水充分洗涤后，再用无水乙醇洗涤；真空干燥后得到4.8克水解产物；在400ml无水甲醇中，外部用冰水冷却下加入8克氯化亚砜，搅拌15分钟后，加入4.80克上述水解产物，反应液搅拌回流8小时后，室温下继续搅拌16小时后，用无水硫酸钠干燥；蒸去溶剂后，生成物用硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇按照99:1展开，收集最先洗出的第一部分；蒸去溶剂后，产品用甲苯重结晶，真空干燥，得到配体微球能量剂前体b；

③制作配体微球能量剂前体c

将1.94克配体微球能量剂前体b加入到120ml乙醇中，然后加入4克氢氧化钾和10ml水，反应液搅拌回流3小时；减压蒸去溶剂，将生成物溶于150ml水中，过滤除去微量不溶物，向搅拌下的溶液中缓慢滴入的三氟乙酸水溶液到三氟乙酸水溶液；充分洗涤，真空干燥，制得到配体微球能量剂前体c；

④制作配体微球能量剂

将配体微球能量剂前体c在盛有P₂O₅真空干燥器中充分干燥后，取181.7mg溶于5ml干燥N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌下加入34.5mg的N-羟基琥珀酰胺(NHS)和61.9mg的N,N’-二环已基碳二亚胺(DCC)，室温下搅拌24小时后，过滤除去不溶物；滤液减压浓缩除去溶剂后，生成物用少量异丙醇洗涤，真空干燥，得配体微球能量剂。