[发明专利]一种光敏检测系统及其制作方法和应用

说明书

本发明公开了一种光敏检测系统及其制作方法和应用，检测系统包括包被有特定光敏剂的光敏微球和配体受氧能量转换微球。检测系统的制作方法为制作光敏剂、制作光敏微球、制作配体微球。本发明还公开一种上述光敏检测系统制作抗心磷脂抗体IgA的测定试剂的应用方法。本发明光敏检测系统中的光敏剂结构牢固不易分解，稳定性好，系统的感光效果好，灵敏度高，具有良好的市场价值。

技术领域

本发明涉及生物分子技术领域，具体涉及一种光敏检测系统及其制作方法和应用。

背景技术

Lumigen公司发明的一种均相化学发光法，使用化学发光标记物标记抗原或抗体，同时使用过氧化物酶标记另一株抗原或抗体，一起去检测样本中的分析物；在纯液相环境下在激光的作用下产生化学发光，达到定量检测的手段。上述方法虽然达到了均化化学发光的检测目的，且具有检测低浓的试剂时具有较好稳定性的有点，但其线性范围比较窄，也存在着局限性，不利广面推广，对检测分子量比较大的蛋白，容易产生钩状效应。

最早的光敏剂可以追溯古埃及，古埃及人曾服用含有光敏剂的药物，然后通过外源性的激光的照射用来治疗白癜风，而在近代又发现了铁卟啉的光敏剂。现在临床上治疗疾病及检测疾病时用经常用到光敏剂，但也在应用中发现存在的问题，如：在液像环境下易被分解，能量转化比较延迟，均一性差等。

发明内容

本发明的目的在于克服上述问题，提供一种使用两种不同的波长相结合的高分子化物合成的光敏剂及以其制作的检测系统，本发明的方案如下：

一种光敏检测系统，包括：

(1)包被有特定光敏剂的光敏微球；

(2)配体受氧能量转换微球(以下简称配体微球)；

所述光敏剂的制作方法为：以重量份数计，将50-100份的四氨基酞菁铜、2.12-3.15 份四氟邻苯二甲腈、0.02-0.10份氯化铜(Ⅱ)、30-90份羟基乙酸乙酯、50-120份碳酸钾和800-1200份吡啶加入到15000份甲苯中，在氮气的保护下加热回流反应4-8小时；真空蒸除溶剂后，用氯仿溶解过滤，滤液减压正干后，在正己烷中重结晶得到所述光敏剂。

本发明公开了一种光敏检测系统的制作方法，包括如下步骤：

S1、制作光敏剂，光敏剂的制作方法与上述光敏剂的制作方法相同；

S2、制作光敏微球

取用羧基化微球，经水和乙醇洗涤后，在30000rpm下离心15-20分钟，加入氨基乙醇，采用油浴法在105℃和搅拌的条件下加热，加热10分钟后加入S1所述光敏剂，加入光敏剂后5分钟加入氢氧化钠；然后在两小时内缓慢降低至室温；冷却后，混合物用乙醇稀释，然后在30000rpm下离心30min，弃去上清，在乙醇中超声重悬沉淀；重复离心，沉淀以水重悬，然后再以乙醇水溶液重悬，得到光敏微球；

S3、制作配体微球

包括：制备配体微球能量剂；使用配体微球能量剂标记待检测物的亲和素；使用标记待检测物亲和素的配体微球能量剂制备配体微球。

本发明还公开了一种光敏检测系统的应用，所述光敏检测系统用于制作一种抗心磷脂抗体IgA的测定试剂。

作为改进，S3中所述制备配体微球能量剂的方法为：

①制作配体微球能量剂前体a

在500ml无水甲醇中加入10-23.0克醋酸铵，16.3克N-[(2’-吡啶基)-2一氧代乙基] 吡啶碘化合物，和10.76克1-(3-吡啶基)-3-(二甲氨基)-2-丙烯-1-酮溶液在搅拌下回流24 小时。反应液冷至室温后，在-15℃放置1小时，过滤收集沉淀，用冷甲醇(-10℃--20℃) 充分洗涤后，产品用乙腈重结晶，得配体微球能量剂前体a；