[发明专利]一种β冠状病毒抗原、其制备方法和应用

说明书

本发明实施例涉及一种β冠状病毒抗原、其制备方法和应用。β冠状病毒抗原的氨基酸序列包括：按照(A‑B)‑(A‑B)样式排列的氨基酸序列或(A‑B)‑C‑(A‑B)样式排列的氨基酸序列或(A‑B)‑(A‑B’)样式排列的氨基酸序列或(A‑B)‑C‑(A‑B’)样式排列的氨基酸序列，所述β冠状病毒抗原为单链二聚体结构。本发明实施例所表达的单链二聚体含量稳定，作为β冠状病毒抗原具有好的免疫原性，该单链二聚体作为β冠状病毒抗原制备成的疫苗能够激发小鼠产生很高滴度的中和抗体。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种β冠状病毒抗原、其制备方法和应用。

背景技术

冠状病毒属于冠状病毒科冠状病毒属，是有囊膜的正链RNA病毒，在所有RNA病毒中其基因组最大，动物和人类都是冠状病毒的宿主。冠状病毒主要感染哺乳动物和鸟类的呼吸道和消化道，目前已知的有7种冠状病毒感染人，其中四种引起不严重的感冒(HCoV-229E,HCoV-NL63,OC43和HKU1)，对全球公共卫生威胁最大的有三种，分别是2002-2003年爆发的严重呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)；2012年爆发并持续至今的中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)；以及2019年暴发的新型冠状病毒(2019-nCoV)，这三种都属于β冠状病毒。

中东呼吸综合征(MERS)是由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染所致的疾病。2012年6月沙特阿拉伯发现第一例MERS病例，并从病例痰液标本中分离到一种新的冠状病毒。这种病毒随后被国际病毒分类委员会冠状病毒小组命名为MERS-CoV。这种病毒在中东地区传播开来，并传至亚洲，非洲，欧洲和北美洲等地。据WHO统计，截止到2015年10月6日，在世界范围内，感染人数1589例，死亡人数567例，死亡率为35.6％(http://www.who.int/entity/emergencies/mers-cov/en/)。尤其是2015年5、6月间由中东输入到韩国的MERS疫情，造成了186人感染，36人死亡的结果。甚至有1例MERS病例输入到我国，给世界公共卫生体系带来了严重威胁。MERS-CoV病毒和2003年爆发的SARS病毒同属于Beta-冠状病毒亚属，却有着比SARS-CoV更高的致死率。MERS-CoV可能通过气溶胶的形式传播，因此很难防控。在中东许多国家的单峰驼的血清里能检测出MERS-CoV的中和抗体，提示单峰驼是MERS-CoV的中间宿主，而单峰驼在中东国家是重要的交通工具。因此，从2012年MERS-CoV被发现以来，在中东地区偶发性的MERS-CoV感染人事件一直没有中断。由此，随着国际交流的日益频繁，MERS在全球传播的风险一直存在。目前世界上仍然没有疫苗和有效的治疗手段。因此，开发一种安全、有效的针对MERS-CoV的疫苗十分紧迫和重要。

2019年，出现了不明原因的肺炎病例，经过病毒的电镜图鉴定，确定是冠状病毒，暂时命名为2019新型冠状病毒(2019novel coronavirus，2019-nCoV)，后又被命名为SARS-CoV-2。新型冠状病毒可以通过呼吸道和飞沫途径在人与人之间传播，也存在通过空气和消化道传播的可能。传染源主要是感染了新型冠状病毒的患者，但是不排除无症状的感染者也是传播源的可能，感染该病毒后可能不会立即发病，病毒的潜伏期较长，1-14天，这对疾病的防控造成困难。新型冠状病毒进入人体后，和SARS类似，通过血管紧张素转酶2(ACE2)进入细胞，感染人体，导致病人出现发烧，干咳以及肌肉疼等临床症状，少数人还会出现鼻塞，咽痛，腹泻等症状，严重的患者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍，造成生命危险。暂时还没有特异性药物，也没有疫苗可以预防，只能使用对症支持治疗。