[发明专利]用于培养MDCK细胞系的培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种用于培养MDCK细胞的无血清培养基，其特征在于：所述用于培养MDCK细胞的无血清培养基中，各组分的浓度以mg/L计为：

基础代谢营养物类：所述基础代谢营养物类为丝氨酸5-55、盐酸精氨酸20-250、亮氨酸20-55、异亮氨酸20-55、酪氨酸20-55、丙氨酸2-10、天冬酰胺2-25、天冬氨酸2-25、盐酸半胱氨酸5-55、谷氨酸2-50、组氨酸5-55、赖氨酸20-250、苯丙氨酸10-55、苏氨酸5-55、色氨酸5-25、缬氨酸20-250；

核苷酸类：所述核苷酸类为次黄嘌呤2-20、胸苷2-5、腺苷2-5、尿苷2-5；

微量元素类：所述微量元素类为硒0.05-0.1、铬0.05-0.1、钴0.02-0.05、镍0.02-0.05、锌0.05-0.1、铜0.05-0.1、锰0.05-0.1、钡0.05-0.1、镓0.02-0.05、锂0.05-0.1、锡0.05-0.1、碘0.05-0.1、钒0.05-0.1、锗0.02-0.05、钼0.02-0.05、硅0.05-0.1、铁0.05-0.1、铷0.02-0.05、锆0.02-0.05、镉0.05-0.1、铝0.05-0.1；

维生素类：所述维生素类为生物素0.02-0.05、D-泛酸钙0.05-0.1、叶酸0.02-0.05、烟酰胺0.02-0.05、盐酸吡哆醇0.02-0.05、核黄素0.05-0.1、盐酸硫胺素0.02-0.05、维生素B12 0.05-0.1、维生素B2 0.05-0.1、肌醇0.05-0.1；

盐类：所述盐类为氯化钠200-500、氯化钾200-500、硫酸铜2-55、硝酸铁2-55、硫酸亚铁2-55、氯化镁2-55、无水磷酸氢二钠20-250、磷酸二氢钠20-250、亚硒酸钠20-250、硫酸锌2-55；

脂质体：所述脂质体为胆固醇1-5、卵磷脂0.02-0.05、月桂酸0.05-0.1、棕榈酸0.05-0.1、吐温-80 1-5；

添加物：所述添加物为D-葡萄糖500-7000、转铁蛋白2-55、胰岛素2-55、牛血清白蛋白500-1000；

酸碱度缓冲剂：所述酸碱度缓冲剂为碳酸氢钠10-1000；

酸碱度指示剂：所述酸碱度指示剂为酚红1-20。

2.如权利要求1所述用于培养MDCK细胞的无血清培养基，其特征在于：所述培养基还包括：抗细胞结团剂硫酸葡聚糖20-150mg/L。

3.如权利要求1所述用于培养MDCK细胞的无血清培养基，其特征在于：所述培养基还包括：抗生素两性霉素B 200-500mg/L。

4.如权利要求1所述用于培养MDCK细胞的无血清培养基，其特征在于：所述培养基支持MDCK细胞的全悬浮培养。

5.如权利要求1-4任一所述用于培养MDCK细胞的无血清培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）制备混合液：将原料干粉用溶剂溶解并混合；

2）调节pH：调节混合液的pH；

3）定容：定容得到用于培养MDCK细胞的无血清培养基。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述原料干粉溶解之前需研磨过筛，所述溶剂选自蒸馏水、去离子水、低级醇中的一种或几种；所述调节pH的溶剂选自氢氧化钠、氨水、氢氧化钾中的一种或几种；所述定容溶剂选自蒸馏水、去离子水中的一种或几种。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述过筛目数为50-200目，所述调节混合液的pH至6.0-7.0。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述过筛目数为100目，所述调节混合液的pH至6.5。

9.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述定容后还包括过滤除菌步骤，采用0.22μm滤膜过滤除菌。