[发明专利]一种非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测试剂盒

说明书

本发明属于非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测技术领域，具体的说是一种非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测试剂盒；所述剂盒包括盒体；所述盒体底部内壁中固连有马达；所述马达驱动轴上固连有第一转轴；所述第一转轴内壁中转动连接有第二转轴；所述第二转轴另一端固连有支撑板；所述支撑板下方于马达驱动轴外表面固连有辅助板；所述辅助板上表面固连有均匀布置的电动伸缩杆；本发明主要用于解决本发明在对多个PCR管内的试液进行离心时，由于多个PCR管的离心不是同时进行的，导致离心后的试液会再次发生扩散，从而影响试液检测的问题，同时现有技术在对试液离心的过程中无法将离心出的混合物进行稳固，从而会使混合物再次扩散的问题。

技术领域

本发明属于非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测技术领域，具体的说是一种非洲猪瘟病毒 荧光PCR快速检测试剂盒。

背景技术

非洲猪瘟(African Swin eFever,ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(African SwineFever Virus,ASFV)引起的一种急性、热性、高度接触性动物传染病，发病迅速，病死率高达90％ 以上，严重危及到养猪业的发展。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告疫病，被我 国列为一类传染病。2018年8月3日，我国首次ASF暴发于沈阳市某猪场，自此以后我国20多个省份又陆续暴发100多起非洲猪瘟疫情，给我国养猪业带来了巨大损失。ASFV基 因组庞大，可达160-190kb，产生的结构蛋白超过了50种，且ASFV感染宿主后诱导宿主 产生的中和抗体水平很低甚至不产生中和抗体，这些特性加大了非洲猪瘟的防治难度。尽 管非洲猪瘟病毒的主要宿主为家猪和野猪以及软蜱，但其存活能力强、传播途径多样，在 粪便、血清、鲜肉和肉制品中均可长期存活，并通过泔水、车辆和人员机械携带、排泄物 和分泌物等不断传播，因此，一个地区一旦发生ASFV感染后就很难消除。本发明为一种 检测试剂盒，试剂盒采用实时荧光PCR方法检测猪血液、脾脏、淋巴结或肾脏淋巴结、 肌肉等组织、粪便、泔水、饲料等环境中的非洲猪瘟病毒(ASFV)的DNA，适用于ASFV的 检测、诊断和流行病学调查。关于对非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测的介绍，可见刊期： 张险朋，非洲猪瘟实验室检测技术研究进展，畜牧兽医科技信息，2019(07)，但是，本 发明在对PCR管离心的过程中存在一些问题，具体包括以下方面：

本发明在对多个PCR管内的试液进行离心时，由于现有技术中的离心装置的离心效果 不高，导致试液在离心时无法将试液中的混合物与液体分离完全，从而导致在检测时无法 检测到准确的数值，同时由于多个PCR管的离心不是同时进行的，导致离心后的试液会再 次发生扩散，从而影响试液检测的问题，同时现有技术在对试液离心的过程中无法将离心 出的混合物进行稳固，从而会使混合物再次扩散的问题。

现有技术中也有一些关于非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测试剂盒的方案，如专利号 201910108734.4专利名称为非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测试剂盒的专利，该技术方案采 用特异性引物ASFV-F和ASFV-R，以及TaqMan探针ASFV-P，探针的5′端标记报告荧光染料为FAM，3′端标记荧光淬灭基团为BHQ-1，进行检测，但是在试液离心的过程中使用的 是现有技术中的设备，从而无法将试液中的混合物进行堆积，从而导致降低检测的准确性。

本发明的试剂盒对非洲猪瘟病毒P72基因的一对特异性引物和一条特异性荧光标记探 针，通过Taqman实时荧光PCR技术检测非洲猪病病毒核酸。P72是非洲猪瘟的主要结构蛋 白，产生于ASFV感染的晚期，位于病毒衣壳的表面，对自然感染具有良好的免疫原性，是一种非常保守的抗原性蛋白。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明提出的一种非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测试剂盒， 本发明主要用于解决本发明在对多个PCR管内的试液进行离心时，由于多个PCR管的离心 不是同时进行的，导致离心后的试液会再次发生扩散，从而影响试液检测的问题，同时现 有技术在对试液离心的过程中无法将离心出的混合物进行稳固，从而会使混合物再次扩散 的问题。