[发明专利]一种去除重组白介素-2内毒素的方法在审

专利信息
申请号: 202010592544.7 申请日: 2020-06-24
公开(公告)号: CN111793124A 公开(公告)日: 2020-10-20
发明(设计)人: 朱文瑾;李浛民;陈平 申请(专利权)人: 宁波博睿瀚达生物科技有限公司
主分类号: C07K14/55 分类号: C07K14/55;C07K1/18
代理公司: 宁波市鄞州盛飞专利代理事务所(特殊普通合伙) 33243 代理人: 邢丽艳;洪珊珊
地址: 315194 浙江省宁波市*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 去除 重组 白介素 内毒素 方法
【权利要求书】:

1.一种去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,所述去除重组白介素-2内毒素的方法包括如下步骤:

S1、在重组白介素-2样品Ⅰ中添加阴离子助溶剂十二烷基硫酸钠(SDS),混匀后调节pH至7.0~7.5,形成重组白介素-2样品Ⅱ;

S2、在重组白介素-2样品Ⅱ中加入氯化钠至其浓度为0.8~1.2mol/L,形成重组白介素-2样品Ⅲ,将所述重组白介素-2样品Ⅲ通过弱阴离子高效液相色谱柱进行动态吸附;

S3、采用平衡液对弱阴离子高效液相色谱柱进行第一次洗脱,所述平衡液中含有浓度为0.8~1.2mol/L的氯化钠,然后采用洗脱液进行第二次洗脱,收集第二次洗脱的洗脱液。

2.根据权利要求1所述去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,所述去除重组白介素-2内毒素的方法还包括采用大肠杆菌生产重组白介素-2发酵液的预备步骤,以形成重组白介素-2样品Ⅰ。

3.根据权利要求1所述去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,步骤S1所述阴离子助溶剂的加入量为重组白介素-2样品Ⅰ的0.03~0.07wt%。

4.根据权利要求1所述去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,步骤S2所述阴离子高效液相色谱柱采用DEAE阴离子交换填料。

5.根据权利要求4所述去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,步骤S2所述DEAE阴离子交换填料的粒度为4~6μm。

6.根据权利要求1所述去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,步骤S3所述平衡液包括的组分及其含量如下,

Tris-HCl缓冲液:8~12mmol/L,PH为7.0~7.5,

NaCl:0.8~1.2mol/L。

7.根据权利要求1所述去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,步骤S3所述洗脱液为Tris-HCL缓冲液,PH为7.0~7.5。

8.根据权利要求1所述去除重组白介素-2内毒素的方法,其特征在于,所述去除重组白介素-2内毒素的方法还包括柱再生的步骤,具体为在所述第二次洗脱之后依次用40~60℃纯净水、1.4~1.6mol/L NaCl溶液对色谱柱进行清洗。

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