[发明专利]一种猕猴桃离体资源的嫁接保存方法

说明书

本发明公开了一种猕猴桃离体资源的嫁接保存方法，涉及离体资源的保存繁育技术领域。本方法包括：A、接穗离体无菌材料的获得；B、接穗的壮苗培育；C、砧木的准备和处理；D、嫁接操作；E、嫁接后的管理。与现有技术相比，本发明具有以下优点和积极效果：①可周年进行生产，人为控制生长环境条件，为猕猴桃种质资源的及时保存繁育提供了新途径；②操作简单易行、成活率高、应用范围广，可保存多种作物育种材料；③水培萌芽进行接穗准备，方便快捷，节约时间，提高效率；④采用微嫁接的操作手段，将离体材料主茎作为接穗直接嫁接到成年的砧木物种枝条上，成活率可达80%以上；⑤采用微嫁接的操作手段，能加快实现对开花结果性状等物候期的观测。

技术领域

本发明涉及离体资源的保存繁育技术领域，具体涉及一种猕猴桃离体资源的嫁接保存方法。

背景技术

猕猴桃[Actinidia chinensis Planch]是猕猴桃科，猕猴桃属大型落叶木质藤本植物。猕猴桃果实质地柔软，口感酸甜。被誉为“水果之王”的猕猴桃酸甜可口，营养丰富，是老年人、儿童、体弱多病者的滋补果品。它含有丰富的维生素C、维生素A、维生素E以及钾、镁、纤维素，世界上消费量最大的前26种水果中，猕猴桃最为丰富全面。猕猴桃果实中的Vc、Mg及微量元素含量最高。在猕猴桃种质资源保育研究中，传统的扦插和嫁接已满足不了日益增长的资源保育需求，组织培养离体保存繁育近年来逐渐凸显优势，但在组织培养相关育种中存在着育种中间材料保存难、生根难、移栽成活率低的问题，野外引种材料由于其道地性、引种栽培成活率低，经组织培养保存的材料移栽成活率也存在很大的困难，以及季节因素影响猕猴桃引种及特异猕猴桃材料的嫁接、扦插栽培成活率等多种问题。

发明内容

本发明的目的在于提出一种猕猴桃离体资源的嫁接保存方法，解决组织培养相关育种中间材料保存难、生根难的问题，解决由离体保存的野外引种资源的道地性、引种栽培成活率低的问题，季节因素影响引种及特异猕猴桃材料的嫁接、扦插栽培成活率低的问题。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

具体地说，本方法包括下列步骤：

A、接穗离体无菌材料的获得：取待保存繁育的猕猴桃资源硬枝于室内水培，硬枝切取成长20-30cm的截段，硬枝形态学上端切口用石蜡密封，形态学下端5-8cm浸泡于装有含0.1-0.2%多菌灵、30-50mg/L萘乙酸的水溶液敞口瓶中，2-3d更换一次水溶液，给予3500-4000Lux的光照，温度控制在18-25℃,7-15d萌芽，取萌发后生长3-5d的幼嫩芽体于超净工作台上进行消毒处理，去掉嫩芽的叶片，切取幼嫩茎段接种于快繁培养基上培养，培养条件为8h/d光照，光照强度2500-3000lux，温度22-26℃，15-20d后茎段腋芽快繁出芽，并于基部再生出多个芽，45d为一个继代周期；

B、接穗的壮苗培育：继代2-3个周期后，切取健壮的单个嫩芽或少量丛芽转移至壮苗培养基，培养条件为12h/d光照，光照强度3000-3500lux，温度22-26℃，25d后，芽体主茎抽长、粗壮，壮苗培养50-60d后离体材料主茎直径达到0.1-0.2cm即可作为接穗进行嫁接，此时的接穗为最佳状态；

C、砧木的准备和处理：砧木为当年穴盘播种实生苗，萌芽后移栽换盆培养，冬季平茬修剪后，于第二年春季萌芽，选取长度为4-6cm、茎直径为0.1-0.3cm健壮的嫩枝作为砧木；