[发明专利]一种用于测定人IL-36/IL36R/IL1RAcP通路抑制剂的生物学活性的方法

说明书

本发明提供了一种用于测定人IL‑36/IL36R/IL1RAcP通路抑制剂的生物学活性的方法，所述方法包括：使用稳定表达IL36R、IL1RacP和NF‑κB报告基因的细胞作为效应细胞，与IL‑36和人IL‑36/IL36R/IL1RAcP通路抑制剂混合后孵育，根据测得的所述报告基因的信号值来测定所述人IL‑36/IL36R/IL1RAcP通路抑制剂的生物学活性。本发明提供的测定方法不需要任何人原代组织来源细胞或其他成分，显色结果稳定，实验周期短，操作简便，并且避免了长时间孵育和多步骤操作所带来的细胞污染和误差；并且，测定的生物学活性与临床疗效相关，符合NMPA相关的技术要求。

技术领域

本发明涉及生物药物的生物学活性检测领域，具体而言，本发明涉及一种用于快速、准确、定量地测定IL-36/IL36R/IL1RAcP通路抑制剂的生物学活性的方法。

背景技术

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，目前已经成为全球医药市场的重要组成部分。单克隆抗体在细胞水平上的生物学活性的测定在单克隆抗体药物的发现与开发中起着重要的作用，目前生物学活性检测方法多采用基于细胞的生物活性测定方法，包括细胞增殖抑制法、细胞毒性法、补体依赖的细胞毒法、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性法、细胞ELISA法和报告基因法。

白细胞介素36细胞因子（Interleukin-36，IL-36）亚家族是通过一系列对人类基因组序列编码IL-1的同系物的分析时发现的，在2010年前分别被称为IL-1 F6、IL-1 F8、IL-1 F9、IL-1F 10和IL-1 F5，后来通过利用多种构建的动物模型进行体外细胞实验发现，IL-1 F6、IL-1 F8、IL-1 F9、IL-1 F5这四个细胞因子有着相同的受体IL-36R，因此依次重新命名为IL-36α、IL-36β、IL-36γ和IL-36 Ra，统称为IL-36；IL-1 F10则命名为IL-38。其中，IL-36 Ra（IL-1F5）被证实为充当IL-36R拮抗剂的IL-1家族成员。IL-36α、IL-36β和IL-36γ作为白介素1（IL-1）的家族成员，其结合IL-36受体（IL-36 receptor，IL-36R也被称为IL-1Rrp2或者IL-1RL2）并且利用IL-1受体辅助蛋白（IL1RAcP）作为共受体来刺激产生与IL-1诱导产生的细胞内信号类似的细胞内信号。