[发明专利]一种肝细胞体外共培养体系及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 202010601331.6 | 申请日： | 2020-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN111808795A | 公开（公告）日： | 2020-10-23 |
| 发明（设计）人： | 高博韬 | 申请（专利权）人： | 广东省医疗器械研究所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 胡辉 |
| 地址： | 510500 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 肝细胞 体外 培养 体系 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种肝细胞体外共培养体系，其特征在于：包括细胞外基质、肝细胞以及3T3-J2成纤维细胞；所述的肝细胞种于所述的细胞外基质上，所述的肝细胞表面铺有所述的3T3-J2成纤维细胞。
2.根据权利要求1所述的肝细胞体外共培养体系，其特征在于：所述的3T3-J2成纤维细胞为3T3-J2成纤维细胞薄片。
3.根据权利要求2所述的肝细胞体外共培养体系，其特征在于：所述的3T3-J2成纤维细胞薄片通过如下步骤得到：将3T3-J2成纤维细胞接种在温度敏感性培养皿上，培养，剥离，得到3T3-J2成纤维细胞薄片。
4.根据权利要求3所述的肝细胞体外共培养体系，其特征在于：所述的培养依次包括第一次培养和第二次培养；
所述的第一次培养的条件为35～39℃、3％～7％CO2浓度下培养3～5天。
5.根据权利要求4所述的肝细胞体外共培养体系，其特征在于：
所述的第二次培养的条件为18～22℃下培养0.5～2.5h。
6.根据权利要求1所述的肝细胞体外共培养体系，其特征在于：
所述的细胞外基质包括胶原、基质胶在内的所有天然类及合成类的细胞外基质；优选为胶原蛋白；更优选为鼠尾腱Ⅰ型胶原蛋白。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的肝细胞体外共培养体系，其特征在于：
所述的肝细胞优选为永生化细胞系、原代细胞、衍生自多能干细胞中的至少一种；更优选为原代细胞；
优选地，所述的肝细胞的来源为人。
8.权利要求1～7中任一项所述的肝细胞体外共培养体系的构建方法，其特征在于：将肝细胞悬液接种于细胞外基质层上，培养；然后，将3T3-J2成纤维细胞薄片铺在肝细胞上，得到肝细胞体外共培养体系。
9.一种试剂盒，包括权利要求1～7中任一项所述的肝细胞体外共培养体系。
10.权利要求1～7中任一项所述的肝细胞体外共培养体系或权利要求9所述的试剂盒在肝毒性药物的安全性评测以及肝毒性药物检测中的应用。
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