[发明专利]一种平菇半乳甘露葡聚糖及其制备方法和用途

说明书

本发明为一种平菇半乳甘露葡聚糖及其制备方法和用途，属于食用菌有效成分制备领域。其平菇半乳甘露葡聚糖是由平菇干燥子实体经过常温破壁提取，结合挤压分离、除蛋白、离子交换层析获得。破壁结合挤压过滤，在该制备方法中缩短了提取时间、减少了试剂用量、节约了能源、提高了多糖得率，并且采用的挤压过滤技术适用于粘稠溶液的分离，获得的平菇半乳甘露葡聚糖具有保护成肌细胞氧化损伤的功能活性，可用于制备保护成肌细胞氧化损伤的辅助药品、保健食品。

技术领域

本发明涉及一种平菇半乳甘露葡聚糖及其制备方法和用途，属于天然产物领域。

背景技术

平菇，学名糙皮侧耳，在我国食用菌年产量中位居前三位。平菇富含蛋白质、多糖、维生素以及微量元素等营养成分，中医认为其具有治疗腰腿疼痛、四肢麻木和舒筋活络等功效。多糖是平菇发挥其药理作用的主要活性成分。受制于平菇多糖制备及药品或保健食品等产品的相关技术开发尚未成熟，尤其是平菇多糖功效的研究，如平菇多糖保肝活性、调节免疫活性仍处于实验室阶段，因此市场上缺少相关产品面世。

近几年，平菇多糖的提取条件的优化、结构分析和药理活性筛选已有一定的研究基础。目前，平菇多糖的提取方法主要有热水浸提法、酶解法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。热水浸提法是提取多糖最常用的方法，工艺方法简单，但存在提取时间长、所用溶剂量大、高温易破坏多糖结构等缺点；酶解法专一性强，只能酶解特定糖苷键，酶制剂费用较高(杨勇,首坤秀,李立郎,等.复合酶法提取平菇多糖工艺优化[J].山地农业生物学报,2019,38(1):29-34)；超声波辅助提取噪音较大(邓斌.超声联合酶法提取平菇多糖工艺优化[J].黑龙江八一农垦大学学报,2019,31(5):66-72)；而微波辅助提取受设备限制，提取量较小(张晓,朱彩平,邓红,等.均匀设计优化超声协同酶法提取平菇多糖工艺[J].食品与机械,2016,32(9):166-171)。上述现有技术均不能满足该类产品产业化开发及生产的大量需求。

发明内容

本发明是针对现有研究及技术的不足，旨在提供一种平菇半乳甘露葡聚糖及其制备方法和用途。

本发明所述的一种平菇半乳甘露葡聚糖，是从平菇中提取的，由岩藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、果糖组成的α-吡喃聚糖，分子量范围2.75×10⁵Da～8.70×10⁵Da。

本发明所述一种平菇半乳甘露葡聚糖的制备方法为由平菇干燥子实体经过常温破壁提取，结合挤压分离、除蛋白、离子交换层析获得。具体步骤如下：

a、对平菇干燥子实体进行粉碎，过40目筛，形成平菇干燥子实体粉末，将平菇干燥子实体粉末装入破壁机中，按料液比1:10～1:80加入去离子水，破壁2～20min，挤压过滤获得原液，在70℃～90℃温度下浓缩提取的原液，浓缩液体积为原液体积的1/3～1/4，冷却至室温，加3～4倍浓缩液体积的无水乙醇，形成混合液1，在4℃环境中静置12h后，5000～10000r/min对混合液1进行离心，离心时间为5～10min，收集下层沉淀，挥发残余乙醇，冷冻干燥，干燥粉末即为平菇子实体粗多糖；

b、加入纯净水，配制成浓度为5mg/mL的平菇子实体粗多糖溶液后，加入氯仿正丁醇混合溶液，磁力搅拌，离心分层，收集上层溶液，重复加入氯仿正丁醇混合溶液1次，离心，取上清液进行减压浓缩至原体积1/3～1/4，加入3～4倍体积的无水乙醇，在4℃环境中静置12h后，形成混合溶液2，5000～10000r/min对混合液2进行离心，离心时间为5～10min，收集下层沉淀，挥发残余乙醇，冷冻干燥，干燥粉末即为平菇子实体多糖；

c、平菇子实体多糖加去离子水溶解，定容，上样DEAE 52纤维素柱层析，依次用纯净水及浓度为0.1mol/L的NaCl溶液洗脱，流速为5mL/3min，进行收集，每管收集5mL，苯酚硫酸法测定各管糖含量，根据各管糖含量收集0.1mol/L的NaCl溶液洗脱峰，冷冻干燥即为平菇半乳甘露葡聚糖。