[发明专利]一种牡丹花粉在液氮中的长效保存法

权利要求书

1.一种牡丹花粉在液氮中的长效保存法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、花粉采集；剪取父本牡丹花朵，在室内去除花瓣和花萼后，放于干净的培养皿中，置于阴凉通风处进行自然干燥，观察花药开裂欲散粉时，轻轻抖动花头并收集花粉，待花粉自然干燥后过筛子，去除杂质；对所需要储存的花粉用TTC法进行活力测定，测定有活力的花粉可进行储存；

步骤二、花粉储存：将花粉装入容器内，并放于液氮罐配置的提斗内，为防止容器在液氮罐内从提斗内飞出，还要将提斗用布包严，之后再将提斗放于液氮罐底部，液氮罐放于阴凉干燥通风处；

步骤三、液氮充足供应；为保证花粉在储存过程中液氮不间断，特准备两个液氮罐，经常观察，待装有花粉的液氮罐其液氮残余量较少时，可将另一个液氮罐加满液氮，并及时将花粉移入新的液氮罐中；

步骤四、计算花粉使用时间，在花粉使用前一星期提前设置冰柜温度的温度为最低温，取出液氮罐内装有花粉的容器放于冰柜内过渡，之后慢慢升高冰柜温度，直至冰柜温度接近自然温度，取出花粉；

步骤五、花粉活力测定：称取0.5gTTC放入烧杯中，加入少许95%的酒精使其溶解，然后用蒸馏水稀释至100ml，溶液避光保存，根据牡丹花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉活力，选择具有活力的牡丹花粉进行杂交，即可解决远缘杂交花期不遇的问题。

2.根据权利要求1所述的一种牡丹花粉在液氮中的长效保存法，其特征在于：步骤一中，所剪取的父本牡丹花朵是处于牡丹初花期、且花尚未开时的花朵。

3.根据权利要求1所述的一种牡丹花粉在液氮中的长效保存法，其特征在于：步骤一中，筛子的筛孔尺寸在40-60目。

4.根据权利要求1所述的一种牡丹花粉在液氮中的长效保存法，其特征在于：步骤二中，装花粉的容器为带盖的一次性塑料离心管，这样可以保证安全、防止变形及花粉溢出。

5.根据权利要求1所述的一种牡丹花粉在液氮中的长效保存法，其特征在于：步骤三中，当灌体重量减少到起始总重量的20%以下时，可将另一个液氮罐加满液氮进行替换。

6.根据权利要求1所述的一种牡丹花粉在液氮中的长效保存法，其特征在于：步骤四中，设置在冰柜内的最低温度为-20℃。