[发明专利]一种达比加群酯原料药或制剂中基因毒性杂质的检测方法

说明书

本发明的目的是提供一种达比加群酯原料药或制剂中对甲苯磺酸己酯的检测方法，采用超高效液相色谱(UPLC)与质谱联用的方法，包括步骤(1)配制供试品溶液和对照品溶液；步骤(2)取供试品溶液和对照品溶液分别进样，用超高效液相色谱‑质谱仪进行检测，记录色谱图，按照外标法计算对甲苯磺酸己酯的含量；该方法操作简单，检测结果准确，灵敏度高，稳定性好，可用于达比加群酯原料药或制剂的质量控制。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种达比加群酯原料药或制剂中基因毒性杂质对甲苯磺酸己酯的检测方法。

背景技术

甲磺酸达比加群酯化学名为β-丙氨酸,N-[[2-[[[4-[[[(己氧基)羰基]氨基]亚氨基甲基]苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基]-N-2-嘧啶-,乙酯,甲磺酸盐，其化学结构如式I所示，是由勃林格殷格翰公司开发的口服直接凝血酶抑制剂，主要用于：(1)非瓣膜性房颤患者中风的预防；(2)已经过5-10天注射用抗凝药治疗的患者深静脉血栓(DVT)和肺栓塞(PE)预防；(3)已经治疗的患者降低DVT和PE复发的风险；(4)髋关节置换术后DVT和PE的预防。

在达比加群酯原料药的合成过程中，使用到甲苯磺酸、己基氯甲酸酯等，会发生反应产生副产物对甲苯磺酸己酯，其化学结构如式II所示，该副产物可进一步转移存在于达比加群酯原料药及终产品达比加群酯制剂中。根据欧洲药品管理局颁布的《基因毒性杂质限度指南》，磺酸酯是具有基因毒性的警示性结构，因此对甲苯磺酸己酯属于潜在基因毒性杂质，能直接或间接损害DNA，在浓度很低时即可造成人体遗传物质的损伤，具有致突变性和致癌性，在用药过程中严重威胁到人类的健康。针对该潜在基因毒性杂质开发灵敏、高效、专属性强的检测方法，严格控制其含量是药物质量控制的关键一环。

然而，关于达比加群酯原料药或制剂中对甲苯磺酸己酯含量测定的方法目前在国内外还没有报道。因此，应制定检测方法，严格控制达比加群酯原料药或制剂中的对甲苯磺酸己酯的含量，以保障临床用药安全。

发明内容

本发明的目的是提供一种达比加群酯原料药或制剂中对甲苯磺酸己酯的检测方法，采用超高效液相色谱(UPLC)与质谱联用的方法，对其在系统适用性、专属性、精密度、检测限、定量限、准确度和耐用性等方面进行验证，使其完全符合中国药典方法验证的指导原则，并且可用于达比加群酯原料药或制剂的质量控制。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种达比加群酯原料药或制剂中基因毒性杂质对甲苯磺酸己酯的检测方法，采用超高效液相色谱(UPLC)与质谱联用，包括以下步骤：

步骤(1)配制供试品溶液和对照品溶液：以甲醇水溶液为溶剂，对待测样品进行溶解，配制得到供试品溶液；以乙腈和/或甲醇水溶液为溶剂，对对甲苯磺酸己酯的标准品进行溶解，配制得到对照品溶液；

步骤(2)取供试品溶液和对照品溶液分别进样，用超高效液相色谱-质谱仪进行检测，记录色谱图；

其中，所述的超高效液相色谱条件为：色谱柱：超高效液相C18色谱柱，2.1mm×100mm(直径×长度)，1.8μm(粒径)；流速：0.3±0.05ml/min；柱温：30±5℃；流动相A：浓度为0.1％的乙酸铵水溶液；流动相B：甲醇；梯度洗脱条件如下：

梯度洗脱条件优选：