[发明专利]一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液及方法有效
申请号: | 202010610067.2 | 申请日: | 2020-06-29 |
公开(公告)号: | CN111718892B | 公开(公告)日: | 2023-04-18 |
发明(设计)人: | 苏广华;李光鹏;杨磊;吴珊珊;王丽娜 | 申请(专利权)人: | 内蒙古大学 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 赵徐平 |
地址: | 010021 内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 体外 胚胎 培养 效率 质量 培养液 方法 | ||
1.一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液,其特征在于,
在SOF培养液的基础上添加体积分数5-10%的胎牛血清,并且仅添加如下微量元素,制得培养液:
五水硫酸铜,1 .0-5 .0μg/L;
七水硫酸锌,500 .00-1000 .00μg/L;
亚硒酸钠,10 .0-30 .0μg/L;
柠檬酸铁,800 .00-1500 .00μg/L;
一水硫酸锰,0 .10-0 .50μg/L;
钼酸铵,0 .5-2 .0μg/L;
偏钒酸铵,0 .10-1 .50μg/L;
六水硫酸镍NiSO4·6H2O,0 .05-0 .2μg/L;
氯化亚锡,0 .05-0 .2μg/L。
2.根据权利要求1所述的一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液,其特征在于,
在SOF培养液的基础上添加体积分数5%的胎牛血清,并且仅添加如下微量元素,制得培养液:
五水硫酸铜,1 .6μg/L;
七水硫酸锌,863 .00μg/L;
亚硒酸钠,17 .3μg/L;
柠檬酸铁,1155 .10μg/L;
一水硫酸锰,0 .17μg/L;
钼酸铵,1 .24μg/L;
偏钒酸铵,0 .65μg/L;
六水硫酸镍,0 .13μg/L;
氯化亚锡,0 .12μg/L。
3.一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养方法,其特征在于,
使用权利要求1或2所述提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液进行牛体外受精胚胎或牛体细胞核移植胚胎的培养;
所述胚胎培养过程包括1细胞、2细胞、4细胞、8细胞、16细胞、桑椹胚和囊胚阶段的牛胚胎培养;
将完成受精的牛体外受精胚胎或已经激活处理完成的体细胞核移植胚胎放入权利要求1或2所述提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液中,38 .5℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养6-7天;
每50μL所述提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液中放置胚胎10-20枚;
每隔24小时半量更换所述提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液。
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