[发明专利]一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液及方法

说明书

本发明公开了一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液及方法，属于家畜胚胎工程技术领域。提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液为在SOF培养液的基础上添加体积分数5‑10％的胎牛血清，并且添加如下微量元素：五水硫酸铜，七水硫酸锌，亚硒酸钠，一水硫酸锰，柠檬酸铁，钼酸铵，偏钒酸铵，六水硫酸镍，氯化亚锡。使用该培养液进行牛体外受精胚胎或牛体细胞核移植胚胎的培养可有效提高牛体外胚胎培养效率和质量。

技术领域

本发明涉及家畜胚胎工程技术领域，更具体的说是涉及一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液及方法。

背景技术

胚胎体外培养是家畜胚胎工程技术领域的重要环节，胚胎培养液是体外受精胚胎和体细胞核移植胚胎在体外发育的基础环境，其对胚胎发育有着至关重要的影响；培养液组分搭配不当或营养成分不足，均会影响胚胎的发育。

目前常用的牛体外胚胎培养液有CR1aa、TCM-199和SOF等，这些培养液一般会配合血清或者血清白蛋白使用。一些微量元素，如锌、铁和硒在胚胎发育阶段具有重要的作用，其是许多酶的组成成分，也参与到一些代谢通路，从而整体调节生命活动。但目前很少有研究报道从微量元素的添加角度出发，来提升牛体外胚胎培养的培养效率和质量。并且在微量元素的添加过程中往往无法实现对牛体外胚胎培养效率和质量的有效提升，甚至还有可能对培养产生负面影响。

因此，如何在培养液中合理添加微量元素，以提高牛体外胚胎培养效率和质量是本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液及方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液，

在SOF培养液的基础上添加体积分数5-10％的胎牛血清，并且添加如下微量元素：

五水硫酸铜，1.0-5.0μg/L；

七水硫酸锌，500.00-1000.00μg/L；

亚硒酸钠，10.0-30.0μg/L；

柠檬酸铁，800.00-1500.00μg/L；

一水硫酸锰，0.10-0.50μg/L；

钼酸铵，0.5-2.0μg/L；

偏钒酸铵，0.10-1.50μg/L；

六水硫酸镍NiSO₄·6H₂O，0.05-0.2μg/L；

氯化亚锡，0.05-0.2μg/L。

优选地，一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液，

在SOF培养液的基础上添加体积分数5％的胎牛血清，并且添加如下微量元素：

五水硫酸铜，1.6μg/L；

七水硫酸锌，863.00μg/L；

亚硒酸钠，17.3μg/L；

柠檬酸铁，1155.10μg/L；

一水硫酸锰，0.17μg/L；

钼酸铵，1.24μg/L；

偏钒酸铵，0.65μg/L；

六水硫酸镍，0.13μg/L；

氯化亚锡，0.12μg/L。