[发明专利]一种具有抗疲劳作用的西藏凹乳芹多糖的制备方法及应用

说明书

西藏凹乳芹(Vicatia thibertica de Boiss)属伞形科。西藏凹乳芹粗多糖可降低乳酸生成含量，增强代谢产物消除效率，从而达到抗疲劳的作用。由此可知，两藏凹乳芹的抗疲劳作用效果明显，且抗疲劳的活性部位为多糖部分。本发明提供一种西藏凹乳芹多糖的制备方法，明确其抗疲劳效果，并深入研究均一多糖组分的抗疲劳机制，开发其在抗疲劳保健品或药品制备中的应用。

技术领域

本发明涉及一种中药提取物，具体涉及一种从西藏凹乳芹中提取分离得到的具有抗疲劳 活性的多糖及其应用。

背景技术

由于工作、生活压力及社会环境因素，约有70％左右人群处在亚健康状态。亚健康状态 是介于疾病和健康之间的一种心理、生理功能降低状态，表现为活力降低、反应能力及适应 能力减退。在日常生活中，“疲劳”已成为一种普遍的亚健康状态表述。疲劳可以是一种症 状形式伴随着其他的疾病，如缺铁性贫血、恶性肿瘤、硬化综合征等出现，又可作为一种疾病单独出现。随着时代发展，疲劳已逐渐成为了影响人类健康的一种“隐形杀手”。世界卫 生组织把疲劳列为了21世纪影响危害人类健康的重要因素之一，因此有关疲劳的研究也引 起了广泛关注。调查发现，有1/2以上的人都会感觉到疲劳，其中有超过1/3的人明确受到疲劳影响而降低了生活质量及工作效率。

越来越多证据显示，从植物中提取的多糖在抗疲劳方面具有低毒、高效的优势。如：枸 杞多糖有抗疲劳作用；五味子多糖显著改善小鼠的抗疲劳和耐缺氧作用；荔枝多糖可增加小 鼠糖原储备，能减少小鼠运动后尿素氮、乳酸的蓄积，具有较好的抗疲劳作用；黄精多糖通过调节小鼠脑内DA和5-HT含量，延缓运动导致的疲劳作用。

西藏凹乳芹(Vicatia thibertica de Boiss)属伞形科。主要分布在云、藏、川等地，尤其是云 南的大理地区其资源丰富。西藏凹乳芹物质成分中糖和糖醇的两种糖含量较高，总多糖的含 量为32.71％。课题组前期研究结果表明西藏凹乳芹的粗提物具有抗缺氧和耐高温等作用，能延长运动小鼠负重游泳力竭时间。而后续的研究中发现西藏凹乳芹粗多糖能显著降低运动性 疲劳小鼠血清中肌酸激酶、血乳酸、血清尿素氮的值，显著提高肝糖原的含量，表明西藏凹 乳芹确实有明显的抗疲劳作用。西藏凹乳芹粗多糖可降低乳酸生成含量，增强代谢产物消除 效率，从而达到抗疲劳的作用。由此可知，西藏凹乳芹的抗疲劳作用效果明显，且抗疲劳的活性部位为多糖部分。但西藏凹乳芹多糖的分子结构和抗疲劳机制尚不清楚，本研究拟对西 藏凹乳芹粗多糖进行分离、纯化，寻找到均一多糖组分。并明确均一多糖组分的抗疲劳效果， 再深入研究均一多糖组分的抗疲劳机制，为西藏凹乳芹在抗疲劳的应用供科学依据。

发明内容

发明目的：本发明的目的是为了发明一种西藏凹乳芹多糖的制备方法，明确其抗疲劳效 果，并深入研究均一多糖组分的抗疲劳机制，开发其在抗疲劳保健品或药品制备中的应用。

技术方案：

1、西藏凹乳芹粗多糖的制备

取干燥的西藏凹乳芹，经粉碎后用10倍量的85％乙醇在室温下浸提3次，乙醇提取后 的西藏凹乳芹，经过干燥后，按照料液比为1∶10加入蒸馏水，85℃加热提取3次，1h/ 次，离心(4500r/min，20min)收集上清液，60℃减压浓缩至浸膏。在搅拌条件下，将浸膏 加入10倍浸膏重量体积的95％乙醇中，室温静置48h，离心(10000r/min，10min)，沉 淀用水溶解，浓缩，冷冻干燥得西藏凹乳芹粗多糖。

2、西藏凹乳芹多糖的纯化

多糖纯度直接影响到多糖质量和作用效果，因此对西藏凹乳芹多糖进一步纯化，具体过 程如下：

(1)脱色

采用大孔吸附树脂(D101型)对以上粗多糖进行脱色。将大孔吸附树脂用95％的乙醇浸 泡24h后，倒入层析柱(10cm×90cm)，用蒸馏水洗脱平衡12h。将粗多糖溶于水，上样后吸附过夜，用蒸馏水洗脱，减压浓缩洗脱液，冷冻干燥后，得到脱色后的粗多糖。