[发明专利]鸭腺病毒Ⅰ型Penton蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.鸭腺病毒Ⅰ型Penton 蛋白，其特征在于：所述重组蛋白Penton的氨基酸序列如SEQID No.1所示。

2.权利要求1所述的鸭腺病毒Ⅰ型Penton蛋白的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）合成Penton 基因，并将Penton基因连接至pET-11a 载体的 NdeI 和 BamHI之间，获得重组质粒pET-11a-Penton；

（2）将步骤（1）中测序正确的重组质粒pET-11a-Penton 为模板加入到E.coli透析式无细胞重组蛋白体系，25℃静止16小时；

（3）收集经步骤（2）离心收集沉淀，通过Ni 柱亲和纯化最终获得上述鸭腺病毒Ⅰ型Penton 蛋白。

3.权利要求2所述的Penton蛋白在制备检测鸭腺病毒Ⅰ型抗体的间接ELISA试剂盒中的应用，其特征在于：所述间接ELISA试剂盒包括表达蛋白ELISA酶标板、阴性对照血清、阳性对照血清、酶标二抗、酶标二抗稀释液、稀释液、洗涤液、显色液和终止液。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述表达蛋白ELISA酶标板以Penton作为包被抗原，每孔包被0.5μg所述Penton蛋白，阳性对照为抗鸭腺病毒Ⅰ型的鸡血清，阴性对照为SPF鸡血清。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述稀释液或洗涤液均为含0.05％Tween-20的PBST，终止液为2M的H₂SO₄溶液，显色液为100mL TMB显色液。