[发明专利]一种基于染色体结构变异的桃果实形状早期检测方法

权利要求书

1.一种检测桃果实形状的引物对组合，由下述四对引物对组成：

P1引物对：

正向引物F：5'GAGACCCGTAGTCTATTAGCAGAGG 3'

反向引物R：5'TTCCTCCACTATTACTTTGACAACA 3'；

P2引物对：

正向引物F：5'AAAAGGAGTTGGACGGTTGAGA3'，

反向引物R：5'CCTATACGGTGGCACCACTTGC 3'；

P3引物对：

正向引物F：5'AGATTCTGGATTTTGCAGTGGTC 3'，

反向引物R：5'TAGGGTTTTCTCTTTTTGGTGTT 3'；

P4引物对：

正向引物F：5'CACAAGGGTAGGGGGGCAAC 3'；

反向引物R：5'CTCCATAAACCGACTTCAACGAG 3'。

2.一种检测桃果实形状的试剂盒，其中含有如权利要求1所述的引物对组合。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括用于PCR反应的试剂。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，用于PCR反应的试剂是Taq酶，缓冲液、纯净水，和样品处理液。

5.一种检测桃果实形状的方法，其特征在于，采用如权利要求1所述的引物对组合对待测桃样品的基因组DNA作为模板进行PCR扩增，

且PCR扩增的顺序如下，先采用所述P1和P2引物对进行扩增检测，若存在没有P2引物扩增条带的样品，继续用所述P3引物对进行扩增检测，若还存在没有扩增条带的样品，继续用所述P4引物对进行扩增检测。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，其中PCR反应液组成如下：

，其PCR反应条件如下：

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，对扩增产物采用琼脂糖凝胶进行电泳检测，并且在结果判定中，当以P1为引物对时，如果出现目的条带，且P2、P3、P4引物对中的任一对、两对或三对引物出现相应目的条带，则判定所述桃样品的果形为扁形；如果P2、P3、P4三对引物对均未出现目的条带，则判定所述桃样品的果实不能正常发育；如果未获得P1目的条带，P2、P3或P4引物对中的任一对、两对或三对出现特异扩增条带，则判定果形为圆形；如果这4组引物对均未获得目标长度的带型，则不能判断待检样品的果实形态。

8.如权利要求5-7任一项所述的方法，其特征在于，所述桃样品为桃的苗期样品。