[发明专利]用于红酒中的白藜芦醇提取检测方法

说明书

本发明公开了一种用于红酒中的白藜芦醇提取检测方法。移取红酒加入酒石酸钠缓冲溶液，振荡获得均匀混合物；添加无水乙醚振荡混合均匀静置；移取上层分离的有机相层于离心管，氮气气氛吹下对收集的有机相层进行浓缩用伯瑞坦‑罗宾森缓冲液复溶；有序介孔碳粉末分散到全氟磺酸型聚合物溶液超声处理，将裸丝网印刷电极用超纯水经超声活化氮气吹干；Nafion‑OMC分散液滴涂在裸丝网印刷电极表面常温干燥，获得有序介孔碳修饰的丝网印花电极；构建电化学传感器对白藜芦醇含量检测。本发明的白藜芦醇提取方法能够最大程度的获得红酒中的白藜芦醇，并且制备的有序介孔碳修饰电极对白藜芦醇的检测具有较高的灵敏度和选择性，电极制备过程简单且成本低廉。

技术领域

本发明涉及目前市售红酒中白藜芦醇的提取，及利用有序介孔碳修饰丝网印刷电极构建简易的电化学传感器对其含量进行测定的一体化方法。

背景技术

目前关于白藜芦醇的提取技术有较多研究，并且多是基于从富含白藜芦醇的植物中的直接提取，其中最具典型代表的是中药材虎杖，其白藜芦醇含量丰富，但是由于中药材的性质难以在国际市场上得到认可。而葡萄以安全无毒且生物活性更优的特点成为最受欢迎的白藜芦醇天然保健品的重要原料，尽管葡萄的白藜芦醇含量很低。作为酿造红酒的原材料，白藜芦醇这一活性成分在红酒中同样存在，并且赋予了红酒抗氧化的功能，受到消费者的广泛青睐。但是目前针对红酒中的白藜芦醇提取技术较少，主要原因在于红酒中含有较多的多酚化合物，除白藜芦醇之外还有槲皮素、花青素、儿茶素等等，这些多酚的存在可能会对红酒中原本含量就不高的白藜芦醇的提取造成干扰。

评价红酒质量优劣的指标有很多，其中红酒内白藜芦醇的含量亦可作为评估红酒抗氧化性能的重要指标，它主要与酿酒过程中选择的葡萄类型、葡萄的生长环境以及葡萄酒加工技术有关。目前针对白藜芦醇的检测技术有很多，其中大多数是基于具有高准确性和灵敏度的毛细管电泳，色谱法，荧光测定法和光谱技术。然而，这些检测技术通常耗时耗力，检测成本和检测技术要求高，并且在实际样品检测中易受到基质的干扰。相比之下，电化学方法由于其固有的特性，例如操作简便，灵敏度高，成本低，响应速度快，并且白藜芦醇具有固有的电化学活性，因此电化学检测方法可以作为白藜芦醇测量的更好替代方法。有序介孔碳作为一种新型的纳米结构碳材料，已被证明是用于电化学检测的理想材料之一。它具有开放且高度互连的孔结构、孔径可控且排列有序、比表面积高、边缘平面缺陷位点密度高、热稳定性好，这些优异的固有属性提供了许多有利于电子/质子转移的位点，并允许有效的质量传输(Walcarius A.Mesoporous materials and electrochemistry[J].Chemical Society Reviews,2013,42(9):4098-4140)。

目前针对白藜芦醇的提取方法中溶剂法是国内外最广泛应用的提取方法，溶剂法对设备要求简单，产品得率较高，但是缺点是成本高，耗时长、杂质含量高，造成提取的白藜芦醇不纯，并且某些溶剂可能具有毒性。除此之外还可以利用碱性水或碱性烯醇、超声波、酶解法、微波辅助萃取法和超临界萃取法来提取白藜芦醇，但是这些提取方法需要专业设备，过程复杂，多需要专业人员参与。

此外由于白藜芦醇具有弱酸性，也可以采用碱性水或碱性烯醇进行提取，利用白藜芦醇在碱性条件下酚羟基可以被转变成盐而使水溶性显著增加的性质，使其在一定条件下和某些无机碱、碱性盐形成酚盐从体系中溶解，再通过调节溶液pH使之沉淀而分离，从而富集提取白藜芦醇。

针对富含白藜芦醇的中药材虎杖可以采用超声波提取法，该方法提取率高，提取时间短，并且有利于保持较高的白藜芦醇含量。酶解法也是很好的白藜芦醇提取方法，酶解作用可以使细胞壁疏松、破裂，减小传质阻力，加速有效成分的释放，提取率进一步得到提高，成为了一项天然物质提取的新兴技术。除了上述四种方法之外，还可以利用微波辅助萃取法和超临界萃取法对白藜芦醇进行提取。

发明内容

本发明的目的在于解决背景技术中存在的问题，填补现有红酒中白藜芦醇提取技术的空白，并且利用有序介孔碳修饰丝网印刷电极构建电化学传感器，实时对提取的白藜芦醇含量进行检测，实现了从提取到检测的一体化处理。