[发明专利]新冠病毒抗体检测试纸条、试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种新冠病毒抗体检测试纸条、试剂盒及其制备方法和应用。本发明提供的新冠病毒抗体检测试纸条包括底板，所述底板上依次有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上含有胶体金标记的新冠病毒重组蛋白S1；所述硝酸纤维素膜上包括检测线和质控线，所述检测线上固定化有新冠病毒重组蛋白S1，所述质控线上固定化有新冠病毒阳性血清；其中，所述新冠病毒重组蛋白S1为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列编码的蛋白。本发明提供的新冠病毒抗体检测试纸条与样品稀释液组装成试剂盒可用于检测不同动物的血清，还可用于新冠病毒溯源检测、新冠病毒动物感染模型研究、药物筛选和疫苗评价等。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种新冠病毒抗体检测试纸条、试剂盒 及其制备方法和应用。

背景技术

冠状病毒(Coronaviridae)属于冠状病毒科冠状病毒属。冠状病毒属的病毒 是具外套膜的正链单股RNA病毒，直径约80-120nm，其遗传物质是所有RNA 病毒中最大的，感染宿主范围宽，可感染人、鼠、猪、猫、犬、禽类脊椎动物。 冠状病毒的一个变种是引起非典型肺炎的病原体，属于RNA病毒。

2020年2月29日，中国和世界卫生组织共同发布了《新型冠状病毒肺炎 (COVID-19)联合考察报告》，该报告明确指出“新冠肺炎病毒是一种动物源性 病毒，但中间宿主尚未查明”。尽快追溯新冠病毒的自然宿主和中间宿主，从源 头上采取针对性的防控措施，乃当务之急，更具长远意义。

因此，针对新冠病毒溯源及其传播途径的研究，当前迫切需要可用于不同动 物血清中新冠病毒抗体的高通量检测方法和试剂，以解决不同动物溯源的问题。

本发明技术人员在试纸条制备过程中发现，不同动物来源血清的基质不一样， 导致检测结果存在假阳性，考虑研制一种样品稀释液，以消除不同动物血清中基 质的影响，提高检测的准确度。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种基于双抗原夹心原理制备的新 冠病毒抗体检测试纸条，以及该试纸条与特制的样品稀释液组装而成的新冠病毒 抗体检测试剂盒。

本发明的第一方面提供了一种新冠病毒抗体检测试纸条，其包括底板，所述 底板上依次有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上含有胶体 金标记的新冠病毒重组蛋白S1；所述硝酸纤维素膜上包括检测线和质控线，所 述检测线上固定化有新冠病毒重组蛋白S1，所述质控线上固定化有新冠病毒阳 性血清；其中，所述新冠病毒重组蛋白S1为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列编 码的蛋白。

根据本发明的一些实施方式，所述新冠病毒抗体检测试纸条包括底板，所述 底板具有第一端和第二端，并且沿所述第一端向第二端的方向上依次有样品垫、 金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜与金标垫接触或与样品垫、 金标垫接触使得新冠病毒抗体与新冠病毒重组蛋白S1的结合体能在其上向底板 第二端迁移。

根据本发明的一些实施方式，所述胶体金标记的新冠病毒重组蛋白S1的量 为5-35μg/ml，例如可以为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35μg/ml。

根据本发明的优选实施方式，所述胶体金标记的新冠病毒重组蛋白S1的量 优选为10-20μg/ml。

根据本发明的优选实施方式，所述胶体金标记的新冠病毒重组蛋白S1的量 优选为10-15μg/ml。

根据本发明的一些实施方式，所述金标垫上的所述含有胶体金标记的新冠病 毒重组蛋白S1的量为12.5-100μg/ml。

根据本发明的优选实施方式，所述金标垫上的所述含有胶体金标记的新冠病 毒重组蛋白S1的量为20μg/ml。