[发明专利]一种CK8基因表达检测试剂盒

权利要求书

1.一种CK8基因表达检测试剂盒，其特征在于，包括针对检测CK8基因mRNA的捕获探针以及信号放大系统；所述信号放大系统包括末端修饰有荧光基团的扩增探针H1和末端修饰有荧光基团的扩增探针H2；其中，

所述捕获探针用于连接CK8基因mRNA与扩增探针H1，每条捕获探针从5’端到3’端的碱基组成依次为：P1序列、间隔臂序列、能与CK8基因mRNA结合的特异性P2序列；所述P1序列为长度为24～26bp，不存在发夹结构，探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配，与特异性P2序列和CK8基因mRNA之间均不存在特异性结合的序列；所述特异性P2序列长度为18～24bp，且特异性P2序列从3’端到5’端的第2～9个碱基处有2～8个碱基进行了锁核酸修饰；

所述扩增探针H1为双荧光标记的发夹结构，用于连接捕获探针与扩增探针H2，每条扩增探针H1从5’端到3’端的碱基组成依次为：能与捕获探针P1序列互补配对的P3序列、P4序列；所述P3序列的3’端碱基与P4序列的3’端碱基互补配对形成发夹结构，P3序列的5’端和P4序列的3’端均修饰有相同的荧光基团；所述P4序列为长度为24～26bp，探针内部不形成二聚体、不存在发夹结构、不存在错配，与P1、P2和CK8基因mRNA之间均不存在特异性结合的序列；

所述扩增探针H2为双荧光标记的发夹结构，用于连接扩增探针H1，每条扩增探针H2从5’端到3’端的碱基组成依次为：能与扩增探针H1的P3序列互补配对的P1序列、能与扩增探针H1的P4序列互补配对的P5序列；所述P1序列与捕获探针的P1序列碱基组成相同；所述P1序列5’端碱基与P5序列的5’端碱基互补配对形成发夹结构，P1序列的5’端和P5序列的3’端均修饰有与扩增探针H1相同的荧光基团；

针对CK8基因mRNA的捕获探针中，P1序列为SEQ ID NO.1，特异性P2序列选自SEQ IDNO.3～SEQ ID NO.12中的5条或5条以上；

针对CK8基因mRNA的扩增探针H1中，P3序列为SEQ ID NO.23，P4序列为SEQ ID NO.25；

针对CK8基因mRNA的扩增探针H2中，P5序列为SEQ ID NO.27。

2.根据权利要求1所述的CK8基因表达检测试剂盒，其特征在于，所述每条捕获探针中特异性P2序列从3’端到5’端的第2～8个碱基处有2～4个碱基进行了锁核酸修饰。

3.根据权利要求2所述的CK8基因表达检测试剂盒，其特征在于，所述每条捕获探针中特异性P2序列从3’端到5’端的第2～5个碱基处有2～4个碱基进行了锁核酸修饰。