[发明专利]一种用于检测固体样品中杂环胺的方法

说明书

本发明公开了一种用于杂环胺分析的固体样品快速净化试剂盒，包括第一提取试剂和第二提取试剂，所述第一提取试剂由氯化钠、SDS、碳酸钠、醋酸铅中的一种或多种组成；所述第二提取试剂为Fe₃O₄@PDA。使用所述试剂盒对杂环胺检测时的固体样品进行净化，除去脂类、色素等基质干扰。所述净化方法包括步骤：取第一提取试剂溶于水，得第三提取试剂；取待净化样品，加入第三提取试剂匀浆并清洗匀浆刀头，将洗涤所得液体与匀浆液混合，离心取上清液，加入第二提取试剂震荡，将固体取出加入甲醇震荡，取甲醇层，得净化样品制备液。可用高效液相色谱‑紫外检测法和高效/超高效液相色谱串联二级质谱等方法，对净化样品制备液中的杂环胺进行检测。

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种用于杂环胺分析的固体样品快速净化试剂盒及净化方法。

背景技术

杂环胺是富含蛋白质的食品在加热过程中经过化学反应产生的一系列致癌、致突变的化合物。流行病学报告显示：过量的杂环胺摄入会使患食道癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌等癌症的风险增大。现阶段，杂环胺的检测技术已较为成熟，最为常用的是高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）和高效/超高效液相色谱串联二级质谱法（HPLC/UPLC-MS-MS），这两种方法自动化程度高，仪器重复性好。但这些测试方法需要对样品特别是固体样品进行净化，以除去样品中脂类、色素等基质干扰。现有前处理手段实验过程耗时长，试剂消耗量大，无法实现大批量样品杂环胺分析。本发明的目的是建立一种简单、快速、稳定、试剂消耗量小的样品前处理试剂盒，改进现有杂环胺分析技术效率和性能。

发明内容

本发明的目的是提供一种样品处理时间短、检测成本低、试剂消耗量小、无需过固相萃取小柱净化的快速测定固体样品中杂环胺的试剂盒。

本发明的另一个目的是提供一种用所述试剂盒净化固体样品的方法。

为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种用于杂环胺分析的固体样品快速净化试剂盒，包括第一提取试剂和第二提取试剂，所述第一提取试剂由氯化钠、SDS、碳酸钠、醋酸铅中的一种或多种组成；所述第二提取试剂为Fe₃O₄@PDA；

优选方式下，所述Fe₃O₄@PDA的制备方法，包括步骤：

S1：取三羟甲基氨基甲烷(Tris)，溶于超纯水中，用盐酸调至pH为7.5～9，得到Tris-HCl溶液；所述Tris和超纯水的质量体积比是(1～10):2g/L；

S2：取多巴胺(PDA)，溶于步骤S1所述Tris-HCl溶液中，得到PDA-Tris-HCl溶液；所述PDA与Tris-HCl溶液的质量体积比是(1～10):2g/L；

S3：取四氧化三铁(Fe₃O₄)，置于PDA-Tris-HCl溶液中，超声使Fe₃O₄在溶液中分散均匀，得到Fe₃O₄ @PDA制备液，震荡；所述Fe₃O₄与PDA-Tris-HCl溶液的质量体积比是(1～10):2g/L；

S4:用磁铁将震荡后的Fe₃O₄@PDA制备液中的固液分离，弃去液体；依次使用醇和去离子水清洗去除杂质，磁力分离，弃去液体；干燥至恒重，得到Fe₃O₄@PDA。

优选方式下，步骤S3所述震荡参数为：100～300rpm，室温震荡2～12h。