[发明专利]一种亚麻荠种子标准指纹图谱建立方法以及检测芦丁含量的方法

权利要求书

1.一种亚麻荠种子标准指纹图谱，其特征在于，该指纹图谱为HPLC标准指纹图谱，包括16个共有特征峰，其保留时间分别为：3.14 min、6.85 min、8.38 min、9.52 min、10.72min、12.60 min、22.56 min、23.08 min、25.76 min、30.96 min、31.99 min、33.05 min、38.37 min、39.83 min、42.65 min、43.48 min。

2.权利要求1所述亚麻荠种子标准指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）供试品溶液制备：称取干燥的亚麻荠种子粉10 g，用150-250 mL 石油醚回流提取6-10 h，挥干石油醚，得脱脂后的亚麻荠种子粉末；精密称取1.0 g脱脂后的亚麻荠种子粉末，加入40-60 mL浓度 70-85%的甲醇，称定重量并记为m，超声提取1-3h，冷却，再称重，用70-85%的甲醇补足重量至m，摇匀，滤过，取滤液过0.22-0.45 µm滤膜即得供试品溶液；

2）指纹图谱制作：供试品溶液进行液相色谱分析，得到亚麻荠种子的指纹图谱；

色谱检测条件为：色谱柱：Angilent Eclipse XDB C18柱；检测器：二极管阵列检测器；柱温：30~40℃；波长：280nm；流动相：乙腈-0.1%甲酸，采用梯度洗脱方式：0→20 min→50min，乙腈10% →17%→ 29%；流速：0.8-1.2.mL/min；进样量：10 µL；

3）标准指纹图谱的确定：按照上述提供的方法，对12批亚麻荠种子建立了HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定了16个共有特征峰，这些共有特征峰构成了亚麻荠种子的指纹特征，可作为亚麻荠种子的标准指纹图谱。

3.一种检测亚麻荠种子中芦丁含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）对照品溶液制备：精确称取芦丁标准品适量，加甲醇溶解，摇匀获得对照品溶液，每1mL对照品溶液中含1000~2000 µg芦丁；精密量取0.2、0.4、0.5、0.8、1.3 mL对照品溶液，置于10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，配制获得一系列不同浓度的对照品溶液；

2）供试品溶液制备：称取干燥的亚麻荠种子粉10 g，用150-250 mL 石油醚回流提取6-10 h，挥干石油醚，得脱脂后的亚麻荠种子粉末；精密称取1.0 g脱脂后的亚麻荠种子粉末，加入40-60 mL浓度 70-85%的甲醇，称定重量并记为m，超声提取1-3 h，冷却，再称重，用70-85%的甲醇补足重量至m，摇匀，滤过，取滤液过0.22-0.45 µm滤膜即得供试品溶液；

3）色谱检测：将上述配制获得的一系列不同浓度的对照品溶液进行色谱检测，以芦丁浓度为横坐标，芦丁峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；将供试品溶液进行色谱检测并记录芦丁的峰面积，代入标准曲线，计算出芦丁含量；

色谱检测条件为：色谱柱：Angilent Eclipse XDB C18柱；检测器：二极管阵列检测器；柱温：30~40℃；波长：280nm；流动相：乙腈-0.1%甲酸，采用梯度洗脱方式：0→20 min→50min，乙腈10% →17%→ 29%；流速：0.8-1.2.mL/min；进样量：10 µL。

4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，称取干燥的亚麻荠种子粉10 g，置于索氏提取器中，加入200mL石油醚回流提取8 h。

5.权利要求1所述亚麻荠种子标准指纹图谱在亚麻荠种子质量控制中的应用。

6.如权利要求5所述亚麻荠种子标准指纹图谱在亚麻荠种子质量控制中的应用，其特征在于，亚麻荠种子的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度不低于0.9。