[发明专利]一种亚麻荠种子标准指纹图谱建立方法以及检测芦丁含量的方法

说明书

本发明提供了一种亚麻荠种子标准指纹图谱的建立和芦丁含量的测定方法，包括供试品溶液的制备、指纹图谱制作和HPLC色谱条件的选择，用高效液相色谱仪对12批亚麻荠种子进行测定，通过分析比较，确定了16个共有特征峰，这些共有特征峰构成了亚麻荠种子的指纹特征，可作为亚麻荠种子的标准指纹图谱。本发明标准指纹图谱出峰多、各峰分离度良好，方法重复性好，所建立的标准指纹图谱能有效地表征和控制亚麻荠种子的质量。

技术领域

本发明属于色谱检测技术领域，具体涉及一种亚麻荠种子标准指纹图谱建立方法以及检测芦丁含量的方法。

背景技术

亚麻荠(Camelina sativa L.)为一年生草本植物，是一种古老的油料作物，属木兰纲，五桠果亚纲，山柑目，十字花科，亚麻荠属(Camelina)。前期研究发现亚麻荠种子中含有丰富的总黄酮，植物甾醇、不饱和脂肪酸、多种氨基酸和微量元素，富含人体必需脂肪酸和多种天然活性成分，研究发现亚麻荠种子中芦丁含量较高，药理学研究发现，芦丁是一种良好的自由基清除剂，具有抗脂质过氧化、保护急性缺血性损伤、抗癌和防紫外等作用。亚麻荠种子颗粒较小，很容易掺假，从而导致种子质量很难控制。目前，尚未有关于亚麻荠种子标准指纹图谱建立以及测定亚麻荠种子芦丁含量的相关报道。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种亚麻荠种子标准指纹图谱建立方法以及检测亚麻荠种子中芦丁含量的方法，该标准指纹图谱可以更好的控制亚麻荠种子质量。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种亚麻荠种子标准指纹图谱，该指纹图谱为HPLC标准指纹图谱，包括16个共有特征峰(1～16)，其保留时间分别为：(1号峰)3.14min、(2号峰)6.85min、(3号峰)8.38min、(4号峰)9.52min、(5号峰)10.72min、(6号峰)12.60min、(7号峰)22.56min、(8号峰)23.08min、(9号峰)25.76min、(10号峰)30.96min、(11号峰)31.99min、(12号峰)33.05min、(13号峰)38.37min、(14号峰)39.83min、(15号峰)42.65min、(16号峰)43.48min。指纹图谱中有16个特征峰，以10号峰芦丁作为参照峰。

一种上述亚麻荠种子标准指纹图谱的建立方法，其包括如下步骤：

1)供试品溶液制备：称取干燥的亚麻荠种子粉10g，用150-250mL石油醚回流提取6-10h，挥干石油醚，得脱脂后的亚麻荠种子粉末；精密称取1.0g脱脂后的亚麻荠种子粉末，加入40-60mL浓度70-85％的甲醇，称定重量并记为m，超声提取1-3h，冷却，再称重，用70-85％的甲醇补足重量至m，摇匀，滤过，取滤液过0.22-0.45μm滤膜即得供试品溶液；

2)指纹图谱制作：供试品溶液进行液相色谱分析，得到亚麻荠种子的指纹图谱；

色谱检测条件为：色谱柱：Angilent Eclipse XDB C18柱(250mm*4.5mm，5.0μm)；检测器：二极管阵列检测器(DAD)；柱温：30～40℃；波长：280nm；流动相：乙腈-0.1％甲酸，采用梯度洗脱方式：0→20min→50min，乙腈10％→17％→29％；流速：0.8-1.2mL/min；进样量：10μL；

3)标准指纹图谱的确定：按照上述提供的方法，对12批亚麻荠种子建立了HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定了16个共有特征峰，这些共有特征峰构成了亚麻荠种子的指纹特征，可作为亚麻荠种子的标准指纹图谱。

本发明提供了一种检测亚麻荠种子中芦丁含量的方法，其包括如下步骤：