[发明专利]一种Setmelanotide的制备方法

说明书

本发明提供了一种制备Setmelanotide的方法，方法中采用氨基树脂为起始树脂，按Setmelanotide的氨基序列反相依次接入相应的保护氨基酸得到Setmelanotide肽树脂，Setmelanotide保护肽树脂经酸解后和再经氧化环化后获得Setmelanotide粗品，Setmelanotide粗品再经过纯化和冻干得到Setmelanotide纯品。本发明工艺操作简单，产品总收率高，适合规模化生产。

技术领域

本发明属于多肽药物制备方法技术领域，特别涉及一种Setmelanotide的制备方法。

背景技术

Setmelanotide是一个寡肽类黑素皮质素-4受体(MC4R)激动剂，研究结果表明，每日皮下注射一次setmelanotide可降低三名LEPR缺陷型肥胖症患者的过度饮食和体重。Setmelanotide的耐受性良好，没有严重的不良事件报告。

Setmelanotide具有以下的结构：

Ac-Arg-c(Cys-D-Ala-His-D-Phe-Arg-Trp-Cys)-NH2

Setmelanotide的制备方法已有很少有报道，中国专利CN201080051643报道了液相片段缩合法，该方法复杂繁琐，不便于大规模生产，本发明提供一种高效的Setmelanotide制备方法，以满足医药用途。

发明内容

本发明提供了一种高效的制备方法，采用氨基树脂为起始树脂，制备工艺操作简单，产品收率高、纯度高。

本发明提供了一种Setmelanotide的制备方法，包括：采用氨基树脂为起始树脂，按Setmelanotide的氨基序列反相依次接入相应的保护氨基酸得到Setmelanotide肽树脂，Setmelanotide保护肽树脂经酸解和再经氧化环化反应后获得Setmelanotide粗品，Setmelanotide粗品再经过纯化和冻干得到Setmelanotide纯品。

上述Setmelanotide的制备方法中，所述的氨基树脂的取代值为0.3～1.5mmol/g树脂，优选的取代值为0.6～1.0mmol/g树脂。

进一步的，所述氨基树脂选自Rink Amide-MBHA树脂、Rink Amide-BHA树脂和RinkAmide树脂，优选Rink Amide-MBHA树脂。

上述Setmelanotide的制备方法中，所述的Fmoc-保护氨基酸的用量为起始树脂氨基总摩尔数的1.2～6倍；优选为2.5～4.0倍。

作为本发明优选的方案，所述固相偶联合成法为：前一步反应得到的保护氨基酸-树脂脱去Fmoc保护基后再与下一个保护氨基酸偶联反应。所述的偶联反应时间为60～300分钟，优选的为100～140分钟。

Setmelanotide肽树脂为：

Ac-Arg(Pbf)-Cys(R1)-D-Ala-His(Trt)-D-Phe-Arg(Pbf)-Trp(R2)-Cys(R1)-氨基树脂其中：R1为Trt，或为Acm

R2为Boc，或为H

优选的，Setmelanotide肽树脂经酸解同时脱去树脂及侧链保护基，再经氧化环化后得到Setmelanotide粗品。

进一步优选的，所述Setmelanotide肽树脂酸解时采用的酸解剂为三氟醋酸(TFA)、1,2-乙二硫醇(EDT)和水的混合溶剂；其中，混合溶剂的体积配比为：TFA为80～95％，EDT为1～10％，余量为水。

更进一步优选的，混合溶剂的体积配比为：TFA为89～91％、EDT为4～6％，余量为水。最优的，混合溶剂的体积配比为：TFA为90％、EDT为5％，余量为水。