[发明专利]一种牛源复合微生态制剂及应用

说明书

本发明公开了一种牛源复合微生态制剂，包括：枯草芽孢杆菌与乳酸乳球菌的混合液，本发明微生态制剂从大别山黄牛体内分离，专一针对黄牛品种，无生物安全问题，在肠道定植效果良好，经过实验室筛选，可以耐受动物体内的酸环境和胆盐环境。经过临床试验证实，本制剂可以促进大别山黄牛犊牛的生长，提高血清免疫球蛋白、细胞因子与抗氧化指标，增强机体的免疫机能和抗氧化机能，同时能够提高肠道内有益菌群的含量，抑制致病菌的繁殖。

技术领域：

本发明涉及生物领域，具体是涉及一种牛源复合微生态制剂及应用。

背景技术：

随着人们对牛肉需求的增加，肉牛养殖业得到了迅猛发展，养殖的规模与密度不断增加，畜舍环境较差，降低了动物的抗病能力，从而增加了动物的患病风险，对抗生素的滥用现象也越发严重，畜产品中药物残留现象频繁，严重威胁到了人类的健康，对环境也造成了极大的破坏。无抗养殖已成为一种必然的趋势，因此，寻求一种绿色添加剂来替代抗生素成为了非常必要的事情。

微生态制剂不仅可以预防疾病、促进动物机体生长发育，而且具有绿色、安全、无残留等优点，被广泛应用于畜牧养殖业。研究表明，由于益生菌黏附作用具有种属特异性，所以利用牛源益生菌来研制牛用微生态制剂具有较好的应用价值和应用前景。目前有关牛专用微生态制剂的报道较为少见。

发明内容：

针对现有技术存在的不足，本发明开展牛源微生态制剂的研制，并通过临床应用效果进行客观评价，研究中所用益生菌从大别山黄牛体内分离，专一针对黄牛品种，无生物安全问题，在肠道定植效果良好，本发明实施例的目的在于提供一种牛源复合微生态制剂及应用，以解决上述背景技术中的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种牛源复合微生态制剂，包括：枯草芽孢杆菌与乳酸乳球菌的混合液。

优选，筛选过程如下：

步骤S1：采集大别山黄牛六段肠道中的内容物；

步骤S2：从采集的样品中分别分离乳酸菌和芽孢杆菌并进行纯化；

步骤S3：对纯化后的菌株进行鉴定；

步骤S4：根据鉴定的结果匹配枯草芽孢杆菌与乳酸乳球菌的混合液为牛源复合微生态制剂。本发明的微生态制剂从大别山黄牛体内分离，专一针对黄牛品种，无生物安全问题，在肠道定植效果良好，经过实验室筛选，可以耐受动物体内的酸环境和胆盐环境。经过临床试验证实，本制剂可以促进断奶大别山黄牛犊牛的生长，提高血清免疫球蛋白、细胞因子与抗氧化指标，增强机体的免疫机能和抗氧化机能，同时能够提高肠道内有益菌群的含量，抑制致病菌的繁殖。

优选，所述步骤S2中乳酸菌分离具体包括：从各个样品中取出0.5g于生理盐水内，摇匀取出100μL的上清液，加入到MRS液体培养基内，培养24h；培养好的菌液倍比稀释到10^-5、10^-6、10^-7三个浓度梯度，将各浓度的菌液各取出100μL涂布于MRS固体培养基，37℃厌氧培养24h；将培养后的平板用接种针挑取生长形态不同的菌落于MRS固体培养基上划线，37℃厌氧培养24h，如此反复四到五次，以纯化菌株。

优选，所述步骤S2芽孢杆菌分离具体包括：从各个样品中取出0.5g于生理盐水内，摇匀，将混匀后的悬浊液置于80℃的水浴锅中水浴处理20min；从悬浊液中取出100μL的上清液，加入到LB液体培养基内，37℃培养24h；培养好的菌液用无菌生理盐水稀释到10^-5、10^-6、10^-7三个浓度，将各浓度的菌液各取出100μL涂布于LB固体培养基，37℃培养24h；将培养后的平板用接种针挑取生长形态不同的菌落在LB固体培养基上划线，37℃培养24h，如此反复四到五次，以纯化菌株。