[发明专利]基于纳米等离子共振的新型冠状病毒颗粒定量检测方法

说明书

一种基于纳米等离子共振的新型冠状病毒颗粒定量检测方法，包括：制备等离光子谐振耦合效应设备和用于放大检测信号的纳米金颗粒；在纳米等离子共振传感芯片表面修饰SARS‑COV‑2捕获抗体，用SARS‑COV‑2标记抗体标记纳米金颗粒；向标记好的纳米金颗粒中加入不同滴度的SARS‑CoV‑2病毒颗粒样品；向待测孔板中加入混合溶液，完成SARS‑CoV‑2病毒颗粒与标记纳米金颗粒复合物的捕获；通过检测加样前后在特定波长下的吸光度差值随时间的变化曲线，实现SARS‑CoV‑2病毒颗粒定量检测。

技术领域

本发明涉及涉及检测技术领域，具体涉及一种基于纳米等离子共振的新型冠状病毒颗粒定量检测方法。

背景技术

分子相互作用动力学的测量在药物发现，遗传筛查和临床诊断中越来越重要，因为动态结合信息可以提高对疾病的认识和可以为治疗提供新思路。表面等离子体共振(SPR)传感器，如商业Biacore SPR生物传感器系统，能够实时监测动力学生物分子相互作用，无需标记，不受大量背景的影响。由于商业Biacore SPR生物传感器系统属于传统SPR设备，所以其需要特制的设备，专人的操作，使得购买或使用该生物传感器系统需要大量的金钱。

新型冠状病毒是截止目前为止，发现的第七种可以感染人类的冠状病毒。是一种单股正链RNA病毒，长度约30Kb，属于基因组最大的RNA病毒之一。新型冠状病毒的突刺糖蛋白S-蛋白，能和人的呼吸道上皮细胞以及肺组织细胞的血管紧张素转化酶2(ACE2)结合，从而进入细胞，以自身RNA链为翻译模板，表达出病毒RNA聚合酶。再进行一系列转录合成、各种结构蛋白mRNA的合成和复制，组装成新的冠状病毒分泌至细胞外。目前，仍没有特效抗病毒的药物来治疗新型冠状病毒，需要患者激发自身免疫力来对抗病毒。现今已开发的SARS-COV-2病毒核酸检测试剂盒存在周期长，对检测人员和环境要求高，检测精准度低，需复核等限制，而针对SARS-COV-2病毒的蛋白检测试剂盒也存在检测灵敏度不高的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在上述缺陷，提供一种基于纳米等离子共振传感芯片的新型冠状病毒颗粒(SARS-CoV-2)的定量检测方法，来解决商业Biacore SPR生物传感器系统检测成本较高的问题以及改良病毒颗粒检测检方式。

根据本发明，提供了一种，基于纳米等离子共振传感芯片的新型冠状病毒颗粒的定量检测方法，包括：

第一步骤：制备孔板以及纳米等离子共振传感芯片，将纳米等离子共振传感芯片布置在孔板的孔中以制备等离光子谐振耦合效应设备；

第二步骤：制备用于放大检测信号的纳米金颗粒；

第三步骤：在纳米等离子共振传感芯片表面修饰SARS-COV-2捕获抗体，用来特异性检测SARS-CoV-2病毒颗粒的滴度；

第四步骤：用SARS-COV-2标记抗体标记纳米金颗粒；

第五步骤：向标记好的纳米金颗粒中加入不同滴度的SARS-CoV-2病毒颗粒样品，制备成混合溶液；

第六步骤：向待测孔板中加入混合溶液，完成SARS-CoV-2病毒颗粒与标记纳米金颗粒复合物的捕获；

第七步骤：通过检测加样前后在特定波长下的吸光度差值随时间的变化曲线，实现SARS-CoV-2病毒颗粒定量检测。

优选地，特定波长为580nm波长、605nm波长、620nm波长、640nm波长中的一个或多个。

优选地，纳米金颗粒是粒径为15～80nm的纳米金颗粒，优选粒径为20-70nm的纳米金颗粒。