[发明专利]表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3/GP5/M基因的重组伪狂犬病毒、构建方法和应用有效

专利信息
申请号: 202010647705.8 申请日: 2020-07-07
公开(公告)号: CN111875678B 公开(公告)日: 2021-10-08
发明(设计)人: 马静云;符军;郑瑶瑶;袁恒星;王海龙;张友明 申请(专利权)人: 华南农业大学;山东大学
主分类号: C07K14/08 分类号: C07K14/08;C12N15/63;C12N15/66;C12N7/01;A61K39/295;A61K39/12;A61P31/14;A61P31/20
代理公司: 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 代理人: 张丽
地址: 510000 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 表达 繁殖 呼吸 综合征 病毒 gp3 gp5 基因 重组 狂犬病毒 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.伪狂犬病毒细菌人工染色体重组载体pBeloBAC11-Bartha-K61,其特征在于,所述感染性克隆pBeloBAC11-Bartha-K61的制备方法为:

S1、以PRV Bartha-K61全病毒基因组两端序列作为左右同源臂,利用SEQ ID NO:28~29所示的引物,通过PCR扩增,将病毒同源臂加载到pBR322-amp-ccdB两端作为第一重组片段;

S2、以pBeloBAC11载体两端作为同源臂,利用SEQ ID NO:30~31所示的引物,通过PCR扩增,将BAC同源臂加载到第一重组片段的两端得到第二重组片段;

S3、步骤S2的第二重组片段与pBeloBAC11载体在E.coli GBdir-gyrA462中进行同源重组,得到带病毒同源臂的pBeloBAC11线性片段;

S4、将步骤S3带病毒同源臂的pBeloBAC11线性片段与S1的第一重组片段在E.coliGB05-dir中进行同源重组,即得重组载体pBeloBAC11-Bartha-K61。

2.权利要求1所述的重组载体pBeloBAC11-Bartha-K61在构建重组伪狂犬病毒中的应用。

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