[发明专利]融合多肽及其用途

说明书

本发明涉及一种融合多肽，其包含载体蛋白和感兴趣的多肽，其中所述载体蛋白具有由环连接的多个螺旋结构域，所述感兴趣的多肽插入所述载体蛋白的环中，所述载体蛋白遮蔽所述感兴趣的多肽上的感兴趣的位点，从而阻断所述位点的可及性。本发明还涉及编码所述融合多肽的多核苷酸和载体，以及包含所述多核苷酸和/或载体的宿主细胞。进一步，本发明还涉及本发明的融合多肽在治疗癌症和/或激活免疫细胞中的用途。

技术领域

本发明涉及融合多肽。具体地，本发明涉及经修饰的免疫调节分子及其在治疗癌症中的用途。

背景技术

通过细胞因子调节免疫系统，例如激活免疫细胞，是癌症免疫治疗的一种策略。然而，细胞因子上的某些位点对其功能(如免疫调节作用)有影响。

例如，白介素-2(IL-2)可以调控免疫细胞的功能。IL-2与受体IL2Rα(CD25)，IL2Rβ(CD122)和IL2Rγ(CD132)结合后，能够激活下游信号通路，包括JAK1与JAK3激酶以及转录因子STAT5，以刺激免疫细胞(比如T细胞与天然杀伤(NK)细胞)的活化与增殖。 IL-2既可以通过CD25/CD122/CD132三聚体进行信号转导，也可以通过CD122/CD132 二聚体激活信号通络。CD25与IL-2结合后会改变IL-2的构象，使其对CD122/CD132 二聚体的亲和力提高100倍(KD值从1nM提高到10pM)。CD122/CD132二聚体主要表达在CD8+记忆T细胞以及NK细胞表面，而CD25/CD122/CD132三聚体则大量表达在起免疫抑制作用的调节T细胞(Treg)表面。因此，IL-2的作用是，根据激活不同的免疫细胞类型，来刺激或者抑制免疫系统的活化。

IL-2同时也是一类备受关注的癌症免疫疗法的潜在药物。重组的IL-2(阿地白介素) 于1998年被美国食品药品卫生监督管理局(FDA)批准用于治疗转移性黑色素瘤和肾癌，是迄今为止唯一被批准的基于IL-2的药物，然而只有10％的患者有响应，且其副作用大，这主要是因为IL-2的双面性，需要较大的剂量才能刺激免疫激活，但剂量较高时又会引起如毛细血管渗漏综合征等副作用。

白介素-15(IL-15)也可以激活免疫反应，对于T细胞与NK细胞的分化与增殖、以及树突细胞的发育有着重要作用。IL-15与IL-2的工作机理有类似之处，通过结合 CD122/CD132受体二聚体来激活下游信号通路(JAK1/JAK3与STAT3/STAT5)，但其α受体与IL-2不同，是其特有的IL-15Rα(CD215)受体。一般认为IL-15在结合细胞膜上的 IL-15Rα受体后，被“反式”(trans，细胞-细胞接触)或者“顺式”(cis，同一个细胞上)以高亲和力递呈到CD122/CD132受体上，也有发现IL-15在不结合IL-15Rα的情况下，也可以以中等亲和力结合CD122/CD132并发挥功能。

最近的文献报导(Alexandra Berger等2019J for ImmunoTherapy for Cancer)，单独的 IL-15与IL-15/IL-15Rα受体胞外区复合物相比，在小鼠肿瘤模型中显示出了更耐久的抗肿瘤活性。申请人认为，这可能是因为复合物虽然能快速强效的刺激免疫，但也会更快的引起免疫细胞耗竭，降低反应耐久性。本领域技术人员也知晓，强烈的免疫刺激可能会带来安全性的问题。

此外，细胞因子，如IL-2和IL-15的体内半衰期短，需要持续注射。

因此，仍然需要开发经工程化的重组细胞因子如IL-2和IL-15，其能够特异性激活免疫并具有延长的半衰期，具有改进的活性，具有更持久的激活免疫的能力，和/或具有更高的安全性，从而提高其临床应用与商业转化价值。

发明内容

在第一方面，本发明提供一种融合多肽，其包含载体蛋白和感兴趣的多肽，其中所述载体蛋白具有由环连接的多个螺旋结构域，所述感兴趣的多肽插入所述载体蛋白的环中，所述载体蛋白遮蔽所述感兴趣的多肽上的感兴趣的位点，从而阻断所述位点的可及性。