[发明专利]用于转移性前列腺癌诊断的标志物和试剂盒

说明书

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种用于转移性前列腺癌诊断的标志物和试剂盒。所述试剂盒包含用于对血液类样本中细胞外囊泡的abhd13、arid2、blcap、cnih4、cnot10、gpt2、ltf、nova2、tes和xpo4基因对应的mRNA进行定量的引物和探针。本发明首次将基因表达谱组合应用于前列腺癌转移的危险级别分级。提供了用于转移性前列腺癌诊断分级的试剂盒和标志物组，从而较好地通过非侵入的方式实现转移性前列腺癌的分级诊断，提高诊断的灵敏度、特异度和准确性。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种用于转移性前列腺癌诊断的标志物和试剂盒。

背景技术

前列腺癌（Prostatic Cancer，PCa）是一种严重威胁男性健康的恶性肿瘤，其发病及死亡率高峰在70岁左右，占全球肿瘤发病率第2位、死亡率第5位。

早期PCa局限于包膜内，但当肿瘤扩散到包膜外或远处转移时，肿瘤的治疗就显得相当困难且预后很差。遗憾的是，目前临床上仍缺乏转移性前列腺癌诊断的分子标志物，临床上多采用价格昂贵且特异性低的PET-CT对前列腺癌的转移进行评估，增加了患者的精神压力也浪费了医疗资源。

细胞外囊泡(EVs)是具有双脂质层的由细胞分泌，存在于细胞外的囊泡。细胞外囊泡内含有细胞来源的核酸、蛋白等分子信息，并能够轻易进入血液、尿液等体液中。由于双脂质层的结构存在，确保囊泡中的生物信息即使在循环系统中依然能够很好的保留。最近通过检测尿液细胞外囊泡中pca3和erg两个基因的表达量来预测血清总PSA在2-10ng/mL患者是否需要前列腺穿刺的方法学(EPI检测法)被美国FDA批准为创新方法。该方法不依赖于前列腺活检即可判断患者是低级别还是高级别的前列腺癌，但AUC在0.73左右，灵敏度和特异性都达不到临床要求。此外，国外现有技术检测血浆或尿液中游离的非编码RNA的相对表达量，从而对前列腺癌转移进行诊断，但诊断效能指标AUC仅在0.7左右，其样本保存等处理条件对检测结果产生的影响很大。

发明内容

本发明涉及一种试剂盒，其含有如下引物和探针：

所述引物和探针对受试者血液类样本中细胞外囊泡的所述待检测mRNA进行定量以用于转移性前列腺癌的诊断、复发风险评估、预后判断、治疗或者辅助治疗。

本发明的再一方面还涉及用于检测如下基因表达量的检测剂在制备用于转移性前列腺癌的诊断、复发风险评估、预后判断、治疗或者辅助治疗的试剂盒中的应用：

abhd13、arid2、blcap、cnih4、cnot10、gpt2、ltf、nova2、tes和xpo4；

所述表达量通过用所述检测剂对受试者血液类样本中细胞外囊泡的所述基因对应的mRNA进行定量以表征。

本发明的有益效果为：

（1）本发明首次将基因表达谱组合应用于转移性前列腺癌的诊断。提供了用于转移性前列腺癌诊断分级的试剂盒和标志物组，从而较好地通过非侵入的方式实现前列腺癌的诊断，提高诊断的灵敏度、特异度和准确性，为选择最佳的临床干预措施提供依据；

（2）检测血清细胞外囊泡中多个基因的表达，而不是游离的基因表达，有效减少血液中复杂成分对核酸造成的降解影响，从而确保样本处理过程不会影响基因检测的结果；

（3）建立多个基因表达谱组合模型，有效避免因为针对单一基因的检测造成的误差；

（4）诊断指标AUC大于0.9，远高于现有的检测方法。

附图说明