[发明专利]一种用于检测外泌体的DNA分子机器

权利要求书

1.一种用于检测外泌体的DNA分子机器，其特征在于，由特征Substrate链和Aptamer锁定的Motor链结合在金纳米颗粒GNP表面构成；

Motor链的特征序列为5’→3’：

GTGCTGAGGTGTAGCATTAGTGTCTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-SH；

构建DNA分子机器的具体步骤为：

S1、DNA分子机器以直径15nm的金纳米颗粒GNP为基础，Substrate链和被CD63 aptamer锁定的Motor链通过链一端的-SH连接到金纳米颗粒GNP表面；

S2、锁住Motor链：将1μL Motor和2μL CD63适体在97μL PBS中混合进行退火；将混合物加热至95℃并在30min内逐渐冷却至4℃；然后，将18μL Substrate和2μL TCEP加入混合物中涡旋混匀；于室温下静置20min后，将上述混合物加入1mL 金纳米颗粒GNP溶液中并在室温下缓慢搅拌12h后加入10μL吐温20，避免金纳米颗粒GNP聚集；

DNA分子运行能量来自于限制性内切酶Nt.BbvCI对特异性序列的切割。

2.根据权利要求1所述的用于检测外泌体的DNA分子机器，其特征在于，Substrate链一端为巯基-SH，另一端为荧光素FAM。

3.根据权利要求1或2所述的用于检测外泌体的DNA分子机器，其特征在于，Substrate链特征序列为5’→3’：

FAM-CACCTCAGCACTTTTTTTTTTTTTT-SH。

4.根据权利要求1所述的用于检测外泌体的DNA分子机器，其特征在于，金纳米颗粒GNP的尺寸为13~25 nm。

5.根据权利要求1或4所述的用于检测外泌体的DNA分子机器，其特征在于，Substrate链和Motor链在金纳米颗粒GNP表面的比例为5:1~50:1。