[发明专利]一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法

权利要求书

1.组蛋白去乙酰化酶抑制剂在提高小麦成熟胚的胚性愈伤组织诱导率和再生率中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂选自曲古抑菌素A或丁酸钠。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述曲古抑菌素A的加入浓度为0.5μM，丁酸钠的加入浓度为200μM。

4.一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对小麦种子进行预处理，将预处理后的小麦种子的成熟胚刮碎，接种于添加有组蛋白去乙酰化酶抑制剂的预培养基中，在黑暗、25℃条件下培养7天，得到小麦成熟胚愈伤组织；

(2)将步骤(1)得到的小麦成熟胚愈伤组织转移到诱导培养基中，在黑暗、25℃条件下培养14天，得到胚性愈伤组织；

(3)将步骤(2)得到的胚性愈伤组织转移到分化培养基中，在光照16小时/天、光强3500Lux、温度25℃条件下培养21天。

5.根据权利要求4所述的组织培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂选自曲古抑菌素A或丁酸钠；所述曲古抑菌素A的加入浓度为0.5μM，丁酸钠的加入浓度为200μM。

6.根据权利要求4所述的组织培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述预培养基以MS基本培养基为基础，并添加有0.75g/L MgCl₂、15.0g/L甘露醇、15.0g/L山梨醇、0.5g/L水解酪蛋白、10.0g/L葡萄糖、1.0mg/L B₁维生素、0.5mg/L B₃维生素、0.5mg/L B₆维生素、2.0mg/L甘氨酸、100mg/L肌醇、78mg/L乙酰丁香酮、2.0mg/L 2,4-D、5.0mg/L AgNO₃、40.0mg/L半胱氨酸、100.0g/L维生素C和10g/L琼脂；pH 5.8。

7.根据权利要求4所述的组织培养方法，其特征在于，步骤(2)中，所述诱导培养基以MS基本培养基为基础，并添加有1.0mg/L B₁维生素、0.5mg/L B₃维生素、0.5mg/L B₆维生素、2.0mg/L甘氨酸、100mg/L肌醇、3.0％蔗糖、2.0mg/L 2,4-D、5.0mg/L AgNO₃和3.0g/L植物凝胶；pH 5.8。

8.根据权利要求4所述的组织培养方法，其特征在于，步骤(3)中，所述分化培养基以MS基本培养基为基础，并添加有1.0mg/L B₁维生素、0.5mg/L B₃维生素、0.5mg/L B₆维生素、2.0mg/L甘氨酸、5.0mg/L谷氨酰胺、2.0％蔗糖、0.2mg/L IAA和3.0g/L植物凝胶；pH 5.8。

9.根据权利要求4所述的组织培养方法，其特征在于，所述小麦种子来自小麦材料CB037、Fielder或中国春。