[发明专利]一种吡柔比星的纯化方法

说明书

本发明提供一种吡柔比星的纯化方法，包括S1将吡柔比星粗品配制成上样液；S2对制备柱进行上样；S3洗脱纯化分离，得到纯化的吡柔比星纯品。其中，纯化分离的溶剂和洗脱剂均由酸、水和有机相组成；其制备柱的填料为硅胶基质，该硅胶基质上键合十八烷基硅烷和二乙烯基苯。本发明的纯化方法采用以硅胶基质为填料，其硅胶上键合十八烷基硅烷和二乙烯基苯的专用特色填料，经过分离纯化得到吡柔比星纯品，其纯度可达99.5％以上，单杂含量小于0.1％，回收率76％以上的吡柔比星纯品；该方法操作方便，省时省力，对环境污染小，其所使用的特色填料寿命长，可反复利用，且该纯化方法已经过放大生产验证，适合工业放大生产。

技术领域

本发明涉及药物化学纯化技术领域，具体涉及一种吡柔比星的纯化方法。

背景技术

吡柔比星(Pirarubicin)，为红色结晶粉末。是一种广谱的抗肿瘤抗生素，对多种肿瘤均有作用，属于周期非特异性药物。适用于治疗乳腺癌，同时对输尿管癌、膀胱癌、卵巢癌、宫颈癌等恶性肿瘤也有一定的疗效。其分子式为：C₃₂H₃₇NO₁₂，分子量为：627.636，分子结构式如式一所示：

吡柔比星为蒽环类抗生素药物，该药物的作用机理为：直接嵌入DNA双链核酸碱基对之间，干扰酶的转录过程，阻止mRNA的合成，抑制DNA聚合酶，从而干扰DNA的合成，使得在G2期的细胞不能进行有效分裂，最终导致肿瘤细胞死亡。

基于上述特性，研究吡柔比星的合成制备以及分离提出技术具有重要价值，其中，合成制备方法比较多，但是针对吡柔比星的纯化技术其专利及文献相对较少。其中专利CN101181280A提供了一种吡柔比星冻干制剂及其制备方法、专利CN101879144A吡柔比星或盐酸吡柔比星脂质体冻干剂及其制备方法以及专利CN101352418A吡柔比星或盐酸吡柔比星脂质纳米粒及其制备方法等三篇，所涉及的方法均为吡柔比星药物制剂的制备方法，并未提及吡柔比星的纯化方法和相关分离技术。而中国药科大学的许建良等在西北药学杂志公开的《吡柔比星的分离与纯化》文献中提到了吡柔比星的纯化方法，该文献所提供的纯化工艺为用硅胶层析柱纯化吡柔比星粗品，以二氯甲烷-甲醇为洗脱液经过两步纯化，将含量35.7％的吡柔比星粗品纯化后得到纯度为99.6％的吡柔比星纯品。但其所提供的纯化方法，是采用硅胶色谱柱层析，对环境污染比较严重，且该纯化方法需要采用两步纯化法，其操作步骤繁琐，对吡柔比星纯化的工业放大生产借鉴意义不大。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种吡柔比星的纯化方法，该方法采用以硅胶基质为填料，其硅胶上键合十八烷基硅烷和二乙烯基苯的专用特色填料，经过分离纯化得到吡柔比星纯品，其纯度可达99.5％以上，单杂含量小于0.1％，回收率76％以上的吡柔比星，且该纯化方法已经过放大生产验证。

为了实现上述目的，本发明提供一种吡柔比星的纯化方法，该纯化方法包括：

S1将吡柔比星粗品配制成上样液；S2对制备柱进行上样；S3洗脱纯化分离，得到纯化的吡柔比星纯品。

其中，所述步骤S1上样液由吡柔比星粗品加入溶剂进行充分溶解配制而成；

所述步骤S2制备柱进行上样，是用所述步骤S1吡柔比星粗品的上样液，对洗脱剂平衡好的吡柔比星制备柱进行上样，所述制备柱内装填硅胶基质填料，所述硅胶基质上键合十八烷基硅烷和二乙烯基苯；

所述步骤S3洗脱纯化分离是用洗脱剂对吡柔比星粗品的制备柱进行洗脱纯化分离，收集洗脱纯化分离组分，取样检测和冷冻干燥；所述洗脱纯化分离的溶剂和洗脱剂均由酸、水和有机相组成；所述酸为甲酸、三氟乙酸中的一种或两种混合；所述有机相为甲醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯中的一种或几种混合；所述酸、水和有机相组成的体积配比为0.5～2：100～400：600～900；所述制备柱的填料为硅胶基质，所述硅胶基质上键合十八烷基硅烷和二乙烯基苯。