[发明专利]一种利用玉米蛋白粉酶法定向制备LPP三肽的方法

权利要求书

1.一种利用玉米蛋白粉酶法定向制备LPP三肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）玉米蛋白粉经研磨后，过80目筛；过筛后的玉米蛋白粉悬浮于水中，按玉米蛋白粉重量的0.05%~0.1%（w/w）加入α-淀粉酶，于45℃下处理2.5h，将得到的水解液用3倍体积的蒸馏水洗涤3次，再按料液比1:3（w/v）加入蒸馏水，高温蒸煮30min，得到预处理的玉米蛋白粉；

（2）取1g预处理的玉米蛋白粉加入到100mL去离子水中，充分搅拌使其均匀分散，得到玉米蛋白粉悬浊液；用1mol/L NaOH调节玉米蛋白粉悬浊液的pH值至13，向调节后pH值为13的玉米蛋白粉悬浊液中加入碱性蛋白酶，加酶量为9000U/g玉米蛋白粉，将其在60℃、140r/min磁力搅拌的条件下水解8h，100℃灭酶10min，得到水解液；

（3）将所述水解液用1mol/L HCl和1mol/L NaOH调节pH值至7.5，然后按照210LAPU/g玉米蛋白粉的量加入风味蛋白酶和7200U/g玉米蛋白粉的量加入木瓜蛋白酶，在60°C的恒温水浴条件下以120r/min的搅拌速度水解8h，随后按照115LAP/g玉米蛋白粉的量加入外切蛋白酶，在70℃水浴中以130r/min的转速水解6h，100℃灭酶10min，得到粗水解液；

（4）将所述粗水解液在10000r/min下离心15min，收集上清液调节pH至7，然后采用分子截留量为5kDa的Biomax超滤膜在入口压力为35PSI的条件下超滤1h；收集透过液，调节其pH值至8，然后用25%（w/v）的XAD-16型大孔树脂在40℃下吸附脱色脱苦2.5h，得到富含LPP三肽的料液；

（5）将得到的料液在超低温下预冷冻后，经真空冷冻干燥2天，得到富含LPP三肽的水解物冻干粉。