[发明专利]一种布鲁氏菌蛋白抗原及其原核表达方法和应用

权利要求书

1.一种编码布鲁氏菌蛋白抗原的基因序列，其特征在于，所述基因序列的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.一种布鲁氏菌蛋白抗原的重组载体，其特征在于，所述重组载体中包含如SEQ IDNo.1所示的基因序列。

3.一种布鲁氏菌蛋白抗原的原核表达的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：

(1)扩增编码布鲁氏菌蛋白抗原的基因序列，所述基因序列的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示，

(2)构建重组载体：将含有SEQ ID No.1所示核苷酸序列的PCR扩增产物连接到pMD19-T克隆载体中，构建得到重组质粒pMD19-BAB；分别酶切重组质粒pMD19-BAB和原核表达载体pET-30a(+)，构建得到包含BAB的编码基因的重组载体pET30-BAB；

(3)表达重组载体pET30-BAB：将重组载体pET30-BAB转化至BL21菌株中，利用IPTG诱导后收集包含BAB的细菌，经离心、纯化得到所述布鲁氏菌蛋白抗原。

4.根据权利要3所述的原核表达的方法，其特征在于，在步骤(1)中，扩增编码布鲁氏菌蛋白抗原的基因序列的引物如SEQ ID No.2、SEQ ID No.3所示。

5.根据权利要3所述的原核表达的方法，其特征在于，在步骤(3)中，采用含尿素和咪唑的PBS重悬液处理离心破碎后的细胞菌液，离心并收集沉淀，获得沉淀重悬液；采用梯度离心法纯化所述沉淀重悬液，获得纯化后的抗原蛋白。

6.如权利要求1所述的基因序列编码、或由权利要求3～5任一项所述的方法制备得到布鲁氏菌蛋白抗原。

7.根据权利要求3所述的布鲁氏菌蛋白抗原，其特征在于，所述布鲁氏菌蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

8.如权利要求6所述的布鲁氏菌蛋白抗原在制备用于检测布鲁氏菌的试剂或试剂盒中的应用。