[发明专利]基于Crispr-cas9技术构建HCMV编码miRNA缺失株的方法及其应用在审
申请号: | 202010661083.4 | 申请日: | 2020-07-10 |
公开(公告)号: | CN113913392A | 公开(公告)日: | 2022-01-11 |
发明(设计)人: | 张艳宇;邓江;宋鑫;马平;吕丽萍;张骞;张阳阳;周锡鹏;许金波 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/85;C12N15/113;A61K45/00;A61P31/22;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 莫舒颖 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 crispr cas9 技术 构建 hcmv 编码 mirna 缺失 方法 及其 应用 | ||
1.一种构建重组人巨细胞病毒的方法,其特征在于:包括利用CRISPR/Cas9方法敲除目的人巨细胞病毒中miRNA基因,得到所述miRNA表达量低于所述目的人巨细胞病毒的重组病毒。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述miRNA能抑制宿主IFNAR1表达,所述miRNA的核苷酸序列是序列表中序列1。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述CRISPR/Cas9方法利用CRISPR/Cas9系统敲除目的人巨细胞病毒中miRNA基因,所述CRISPR/Cas9系统包括表达sgRNA的载体,所述sgRNA的编码序列为序列表中序列2第1-19位序列和/或序列表中序列2第1-19位序列的反向互补序列。
4.权利要求1-3任一项所述的方法在鉴定人巨细胞病毒miRNA功能中的应用。
5.权利要求1-3任一项所述的方法在制备鉴定人巨细胞病毒miRNA功能的产品中的应用。
6.由权利要求1-3任一项所述的方法构建的重组人巨细胞病毒。
7.权利要求6所述的重组人巨细胞病毒在鉴定人巨细胞病毒miRNA功能中的应用。
8.权利要求6所述的重组人巨细胞病毒在制备鉴定人巨细胞病毒miRNA功能的产品中的应用。
9.抑制miRNA分子的活性和/或降低所述miRNA分子的表达量和/或降低所述miRNA分子的含量的物质在制备抗病毒药物中的应用,其特征在于:所述miRNA分子能抑制宿主IFNAR1表达,所述miRNA分子的核苷酸序列是序列表中序列1。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:所述抗病毒药物为抗疱疹病毒的药物,具体为抗巨细胞病毒的药物,更具体为抗人巨细胞病毒的药物。
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