[发明专利]一种重组的伪狂犬病病毒及其疫苗组合物有效
申请号: | 202010661997.0 | 申请日: | 2020-07-10 |
公开(公告)号: | CN113201507B | 公开(公告)日: | 2022-02-22 |
发明(设计)人: | 张强;钱泓;吴有强 | 申请(专利权)人: | 浙江海隆生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/869;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/93 |
代理公司: | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人: | 贾师英 |
地址: | 312366 浙江省绍兴市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 狂犬病 病毒 及其 疫苗 组合 | ||
1.一种重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,其基因组包含下述外源基因:
编码非洲猪瘟病毒来源的衣壳蛋白P72的核苷酸序列A;
编码用于促使衣壳蛋白P72正确表达及折叠的辅助蛋白的核苷酸序列B;
编码非洲猪瘟病毒来源的外囊膜蛋白CD2V的核苷酸序列C,
该伪狂犬病病毒形成的外源免疫原混合物仅包含最外层的囊膜CD2V和最外层的衣壳蛋白p72。
2.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述辅助蛋白是非洲猪瘟病毒来源的B602L蛋白。
3.如权利要求1或2所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述外源基因仅包含核苷酸序列A、核苷酸序列B和核苷酸序列C。
4.如权利要求2所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述核苷酸序列A为SEQ IDNO:1;所述核苷酸序列B为SEQ ID NO:2;所述核苷酸序列C为SEQ ID NO:3。
5.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述重组的伪狂犬病病毒适合于在细胞内复制并表达核苷酸序列A、核苷酸序列B和核苷酸序列C,所述细胞选自用于病毒增殖的细胞。
6.如权利要求5所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述细胞选自哺乳动物细胞、鸟类细胞或昆虫细胞。
7.如权利要求5所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述细胞选自下组:肺泡巨噬细胞、猪骨髓来源细胞、Vero细胞、COS-1细胞、人胚肾293细胞、小鸡胚胎纤维原细胞、中国仓鼠卵巢细胞、幼仓鼠肾细胞、非洲绿猴肾细胞、宫颈癌细胞、perC6细胞、sf9细胞。
8.如权利要求5所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,P72可溶性的比例在上述细胞内占p72总量的20%以上。
9.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述基因组的至少一个复制非必需区发生缺失和/或替代,所述复制非必需区选自伪狂犬病病毒的gC、gE、gG、gI、gM、TK、RR、PK编码区中的一个以上。
10.如权利要求9所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,所述基因组的复制非必需区中的gE和/或gG编码区发生缺失。
11.如权利要求9所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,核苷酸序列A、核苷酸序列B和核苷酸序列C位于所述基因组的复制非必需区。
12.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,P72基因的表达框为CMV-P72-bGH,其中CMV是CMV启动子,p72是目的基因,bGH是牛生长激素终止子。
13.如权利要求2所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,B602L基因的表达框为SV40-B602L-hGH,其中SV40是SV40启动子,B602L是目的基因,hGH是人生长激素终止子。
14.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,CD2V基因的表达框为EF1α-CD2V-HSV-TK,其中EF1α是EF1α启动子,CD2V是目的基因,HSV-TK是疱疹病毒TK基因终止子。
15.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒,其特征在于,不加载p12、p14(E120R)、pE248R、p22、P32、P54。
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